[發明專利]一種膠體金的制備方法及檢測鉛離子的檢測試紙

在審

• 申請號: 201610388206.5
• 申請日: 2016-06-03
• 公開（公告）號: CN107462711A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發明（設計）人: 周秋香;高永闖;孫超;陳宇;李素紅;陳樂培;路永軍;申磊
• 申請（專利權）人: 周秋香;高永闖
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 北京工信聯合知識產權代理有限公司11266
• 代理人: 郭一斐

技術領域

本發明涉及免疫學技術領域，具體涉及一種膠體金的制備方法，以及利用該膠體金快速檢測鉛離子的檢測試紙。

背景技術

鉛是當前工業生產中的兩種主要原料，對人體的危害很大。鉛中毒可引起神經衰弱和消化不良，嚴重的可發生鉛腦病，形成癲癰、癡呆或精神煩躁錯亂，視力減退甚至失明。我國地下水質量標準（GB/T14848-93)中規定，主要適用于集中式生活飲用水水源及工、農業用水的鉛離了限量< 0.05mg/L。

目前，檢測鉛離子的方法主要有儀器分析法和酶聯免疫分析法。離子色譜、石墨爐原子吸收法、紫外-可見分光光度法、原子熒光分析法等檢測方法雖然能精確測量樣品中單種金屬的總量，但檢測相對時間長、費用高，需要進行大量的樣品預處理不能用于現場檢測。

發明內容

鑒于現有技術中的不足，提出了本發明，以便提供一種克服上述問題或至少部分地解決上述問題的一種膠體金的制備方法以及利用該膠體金檢測鉛離子的檢測試紙。

根據本發明的一個方面，提供一種膠體金的制備方法，所述方法包括如下步驟：將濃度為0.3g/L的氯金酸溶液放入錐形瓶，用恒溫電磁攪拌器加熱至沸騰并持續 5min，加入1%檸檬酸三鈉水溶液5mL，至溶液呈透亮的酒紅色；室溫冷卻，冰箱保存備用，獲得直徑約為 50nm的大粒徑膠體金溶液用于標記羊抗鼠IgG。

進一步的，所述濃度為0.3g/L的氯金酸溶液可采用1%的氯金酸溶液進行配置。

根據本發明的另一方面，還提供一種利用上述膠體金進行鉛離子檢測的檢測試紙，所述檢測試紙包括襯板、在襯板上銜接的樣品墊、金標結合墊、包被膜和吸水墊。

進一步的，所述金標結合墊為吸附鉛離子金標抗體的玻璃纖維棉，在包被膜上依次有用鉛離子偶聯載體蛋白的溶液印制的直線式隱形檢測線，用羊抗鼠IgG溶液印制的直線式隱形對照線。

進一步的，所述襯板為不吸水的硬質塑膠條，或不吸水硬紙條。

進一步的，所述吸水墊為吸水濾紙或濾油紙。

進一步的，所述樣品墊為玻璃纖維棉或尼龍膜。

進一步的，所述包被膜為硝酸纖維素膜或純纖維素膜。

進一步的，金標抗體鉛離子為膠體金標記的鉛離子抗體，偶聯鉛離子的載體蛋白為匙孔血藍蛋白或為牛血清白蛋白BSA，螯合劑為對硫氰芐基-乙二氨四乙酸。

進一步的，所述檢測試紙的檢測判定結果為：如果在包被膜上僅有C線一條紅線顯色，表示檢測結果為陽性，說明在待測樣品中鉛離子濃度大于20ng/mL；如果在包被膜上C線和T線兩條紅線都顯色，表示檢測結果為陰性，說明在待測樣品中鉛離子濃度低于20ng/mL；如果在包被膜上C線紅線不顯色，則表明試紙條已失效。

本發明能有效克服現有儀器檢測鉛離子技術缺陷，實現其重金屬鉛離子快速檢測，具有靈敏度高、操作時間短，檢測準確率高的特性。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例的技術方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動性的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發明實施例的一種檢測鉛離子結果的示意圖。

具體實施方式

下面將參照附圖更詳細的描述本發明的示例性實施例。雖然附圖中顯示了本發明的示例性實施例，然而應當理解，可以以各種形式實現本發明，而不應被這里闡述的實施例所限制。相反，提供這些實施例是為了能更透徹的理解本發明，并且能夠將本發明的范圍完整的傳達給本領域的技術人員。

本發明的檢測方法是利用重金屬免疫學檢測原理，為重金屬離子檢測提供了另一種途徑。該方法具有檢測速度較快、費用低、易操作和高靈敏度的特點。這種方法能應用于產生合適抗體的任何重金屬離子。

根據本發明的一個方面，提供一種膠體金的制備方法，所述方法包括如下步驟：將濃度為0.3g/L的氯金酸溶液放入錐形瓶，用恒溫電磁攪拌器加熱至沸騰并持續 5min，加入1%檸檬酸三鈉水溶液5mL，至溶液呈透亮的酒紅色。之后室溫冷卻，冰箱保存備用。獲得直徑約為 50nm的大粒徑膠體金溶液用于標記羊抗鼠IgG。其中，濃度為0.3g/L的氯金酸溶液可采用1%的氯金酸溶液進行配置。