[發明專利]提高紅霉素生產菌的碳源利用率和轉化效率從而改進紅霉素合成效率的方法

有效

• 申請號: 201610380439.0
• 申請日: 2016-06-01
• 公開（公告）號: CN107446944B
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 儲炬;陳沖沖;黃明志;洪銘;莊英萍;歐陽立明;宋佳麗
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12N1/21;C12P19/62;C12R1/01
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1. 一種提高紅霉素生產菌Saccharopolyspora erythraea HL3168 E3對碳源的利用率和轉化效率從而改進紅霉素合成效率的方法，其特征在于，所述方法包括：以紅霉素生產菌Saccharopolyspora erythraea HL3168 E3為出發菌株，敲除其基因組中SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列的基因片段，從而獲得紅霉素合成效率改進的紅霉素生產菌；所述碳源包括豆油。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法中，當pH第一次上升至7.5以上時開始補葡萄糖，補糖4 h后開始補加50%(v/v)正丙醇和純豆油。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法還提高紅霉素生產菌Saccharopolyspora erythraea HL3168 E3的：

平均氧消耗速率，

丙酰-CoA和甲基丙二酰-CoA的生成速率，

總NADPH比生成速率，和/或

總ATP比生成速率。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，通過同源重組的方法敲除紅霉素生產菌Saccharopolyspora erythraea HL3168 E3基因組中SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，通過同源重組的方法，將阿泊拉霉素和硫鏈絲菌素抗性基因替換Saccharopolyspora erythraea HL3168 E3基因組中SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列。

6.一種碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌，其特征在于，該菌是以Saccharopolyspora erythraea HL3168 E3為出發菌株，在該出發菌株的基因組中將SEQID NO: 1所示核苷酸序列的基因片段敲除而獲得；所述碳源包括豆油。

7.如權利要求6所述的碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌，其特征在于，其基因組中SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列被抗性基因替換。

8.如權利要求7所述的碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌，其特征在于，所述的抗性基因包括：硫鏈絲菌素抗性基因和/或阿泊拉霉素抗性基因。

9.如權利要求8所述的碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌，其特征在于，該菌株能利用更多氧氣用于呼吸代謝，從而產生更多ATP用于產物合成。

10.權利要求6-9任一所述的碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌的用途，用于生產紅霉素。

11.一種生產紅霉素的方法，其特征在于，所述方法包括：培養權利要求6-9任一所述的碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌，從而生產紅霉素；所述碳源包括豆油。

12.如權利要求11所述的方法，其特征在于，培養權利要求6-9任一所述的碳源利用率和轉化效率改進的紅霉素生產菌時，所述的碳源還包括：淀粉，葡萄糖，正丙醇。