[發(fā)明專利]一種時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法及其裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610379775.3
• 申請日: 2016-06-01
• 公開（公告）號: CN106053786B
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發(fā)明（設計）人: 吳俊清;章健;吳冠英
• 申請（專利權）人: 章健;吳俊清;吳冠英
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/543
• 代理公司: 成都環(huán)泰知識產權代理事務所(特殊普通合伙)51242
• 代理人: 鄒翠,鄧瑞

1.一種時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法，其特征在于：待檢測樣本溶液中含包被了時間分辨熒光標記物的磁微球，將待檢測樣本溶液分成等量的若干份，分批次匯聚磁微球并進行熒光標記物時間分辨熒光的檢測，得到多次檢測的統(tǒng)計結果，從而完成對整個樣本溶液中熒光標記物的含量檢測；單次時間分辨熒光檢測的步驟如下：

1）在兩端開口的石英管中持續(xù)通入樣本溶液，同時啟動激發(fā)光光源，石英管的一側設置電磁鐵，在電磁鐵的磁場作用下，使流動溶液中的磁微球駐留在電磁鐵的前端，隨著液體的流動，石英管內的磁微球匯集數量不斷增加，形成匯集點; 所述石英管磁微球匯集點處的一側設置散射光收集光路，收集磁微球在光照射時產生的散射光，樣本溶液通入石英管時，實時監(jiān)測匯集點處磁微球的匯聚數量；當磁微球在匯集點聚集的數量達到1～100000粒之間的設定值時，停止通入樣本溶液；

2）停止通入樣本溶液，光線通過激發(fā)光路聚焦在匯集點的磁微球上，經至少10微秒后關閉激發(fā)光光源；再經10-2000微秒的設定時間后，收集磁微球結合的熒光標記物的時間分辨熒光信號，并轉換為電信號，進行時間分辨熒光標記物的含量檢測。

2.一種時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法，其特征在于：待檢測樣本溶液中含包被了時間分辨熒光標記物的磁微球，將待檢測樣本溶液分成等量的若干份，分批次匯聚磁微球并進行熒光標記物時間分辨熒光的檢測，得到多次檢測的統(tǒng)計結果，從而完成對整個樣本溶液中熒光標記物的含量檢測；單次時間分辨熒光檢測的步驟如下：

1）在兩端開口的石英管中持續(xù)通入樣本溶液，同時啟動激發(fā)光光源，石英管的一側設置電磁鐵，在電磁鐵的磁場作用下，使流動溶液中的磁微球駐留在電磁鐵的前端，隨著液體的流動，石英管內的磁微球匯集數量不斷增加，形成匯集點; 所述磁微球中加入了與熒光標記物波長不同的熒光物質，在激發(fā)光照射下的磁微球自帶熒光，所述石英管的一側設置有自帶熒光收集光路，樣本溶液通入石英管時，實時監(jiān)測匯集點處磁微球的匯聚數量；當磁微球在匯集點聚集的數量達到1～100000粒之間的設定值時，停止通入樣本溶液；

2）停止通入樣本溶液，光線通過激發(fā)光路聚焦在匯集點的磁微球上，經至少10微秒后關閉激發(fā)光光源；再經10-2000微秒的設定時間后，收集磁微球結合的熒光標記物的時間分辨熒光信號，并轉換為電信號，進行時間分辨熒光標記物的含量檢測。

3.根據權利要求1或2所述的一種時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法，其特征在于：所述石英管為中空透明管，其內徑為0.1-10mm。

4.根據權利要求2所述的一種時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法，其特征在于：所述石英管的內徑和外徑均為方形。

5.根據權利要求1或2所述的一種時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法，其特征在于：溶液樣本在石英管中的流速恒定為0.1～100厘米/秒。

6.權利要求1所述時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法的裝置，其特征在于：包括樣本抽取機構、磁微球匯集機構、磁微球數量監(jiān)測機構和時間分辨熒光檢測機構；所述的樣本抽取機構包括吸液針頭、石英管和吸液泵，所述吸液針頭連接石英管，石英管連接吸液泵；所述的磁微球匯集機構為恒流源供電線圈纏繞的電磁鐵，所述電磁鐵的一端朝向石英管；所述的時間分辨熒光檢測機構包括激發(fā)光光源、第一光電轉換器、激發(fā)光路和時間分辨熒光收集光路；所述激發(fā)光光源的光線通過激發(fā)光路聚焦在石英管上，且石英管內的磁微球匯集點與電磁鐵朝向石英管的位置相同，所述的時間分辨熒光收集光路對應該匯集點的位置設置，所述的第一光電轉換器對應時間分辨熒光收集光路；所述的磁微球數量監(jiān)測機構包括散射光收集光路和第二光電轉換器，所述散射光收集光路對應所述匯聚點的位置設置，所述的第二光電轉換器對應散射光收集光路。

7.權利要求2所述時間分辨熒光標記物的熒光檢測方法的裝置，其特征在于：包括樣本抽取機構、磁微球匯集機構、磁微球數量監(jiān)測機構和時間分辨熒光檢測機構；所述的樣本抽取機構包括吸液針頭、石英管和吸液泵，所述吸液針頭連接石英管，石英管連接吸液泵；所述的磁微球匯集機構為恒流源供電線圈纏繞的電磁鐵，所述電磁鐵的一端朝向石英管；所述的時間分辨熒光檢測機構包括激發(fā)光光源、第一光電轉換器、激發(fā)光路和時間分辨熒光收集光路；所述激發(fā)光光源的光線通過激發(fā)光路聚焦在石英管上，且石英管內的磁微球匯集點與電磁鐵朝向石英管的位置相同，所述的時間分辨熒光收集光路對應該匯集點的位置設置，所述的第一光電轉換器對應時間分辨熒光收集光路；所述的磁微球數量監(jiān)測機構包括磁微球自帶熒光收集光路和第三光電轉換器，所述磁微球自帶熒光收集光路對應所述匯聚點的位置設置，所述的第三光電轉換器對應磁微球自帶熒光收集光路。