[發明專利]一種子宮內膜癌特異性檢測的試劑盒

在審

• 申請號: 201610369830.0
• 申請日: 2015-11-22
• 公開（公告）號: CN105785007A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 李靜
• 申請（專利權）人: 李靜
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種用于檢測子宮內膜癌的試劑盒及其檢測方法。

背景技術

子宮內膜癌作為女性生殖道三大惡性腫瘤之一，占女性生殖道惡性腫瘤的20- 30％，在某些歐美國家已居女性生殖道惡性腫瘤首位，嚴重威脅婦女健康。隨著社會發展和 人類平均壽命的延長，內膜癌發病率逐年上升并伴有年輕化趨勢。子宮內膜癌如果能做到 早期診斷，合理治療，其預后一般較好。子宮內膜癌的主要臨床表現為不規則陰道流血，與 卵巢癌等其他腫瘤不同，臨床診斷主要依靠診斷性刮宮，但哺乳期或浸潤型子宮內膜癌的 患者，其子宮壁薄弱，刮宮時可能會造成穿孔，給患者造成傷害。

CyclophilinA蛋白(CYPA)又稱親環素A(GeneBankNo.NP_066953)，位于胞質及 胞核，具有肽酰脯氨酰順反式異構酶活性，參與蛋白質折疊、裝配與運輸；在細胞內與環孢 素A結合，抑制T細胞活化途徑，表現出免疫抑制作用，此外還參與氧化應激誘導及膽固醇代 謝過程，并發揮細胞因子的功能。現有技術已經報道，通過檢測人親環素A表達水平來早期 診斷子宮內膜癌。因此，檢測人親環素A變得尤為重要。

核酸適體(Aptamer,又稱適配體,適配子)是能高親和性、高特異性的結合某種生 物質的單鏈寡核酸分子(ssDNA或ssRNA)。核酸適體是通過指數富集配體系統進化技術 (SystematlcEvolutlonofLlgandsbyExponentlalenrlchment,SELEX)從人工合成的 DNA/RNA文庫中篩選得到的能夠高度特異性結合靶標分子的單鏈DNA/RNA。已報道核酸適體 的靶標包括金屬離子、有機小分子、多肽、蛋白質、細胞甚至組織等。核酸適體的分子識別功 能與抗體類似，具有與抗體分子相當甚至更強的靶標識別能力。

發明內容

本發明的目的是提供一種特異結合CYPA的核酸適體及其試劑盒。

本發明提供的核酸適體，是序列表的序列1-14所示的單鏈DNA。

所述核酸適體與CYPA蛋白具有較好的親和能力。

還可將所述核酸適體進行修飾或改造，得到所述核酸適體的衍生物。

所述核酸適體的衍生物可為如下任意一種：

a)將所述核酸適體刪除部分或增加部分互補的核苷酸，得到的與所述核酸適體具 有相同功能的核酸適體的衍生物；

b)將所述核酸適體進行核苷酸取代或部分修飾，得到的與所述核酸適體具有相同 功能的核酸適體的衍生物；

c)將所述核酸適體的骨架改造為硫代磷酸酯骨架，得到的與所述核酸適體具有相 同功能的核酸適體的衍生物；

d)將核酸適體改造為肽核酸，得到的與所述核酸適體具有相同功能的核酸適體的 衍生物；

e)將所述核酸適體連接上熒光、放射性和治療性物質后，得到的與所述核酸適體 具有相同功能的核酸適體的衍生物。

所述核酸適體可用于制備檢測CYPA的試劑盒。

利用本發明的核酸適體，可以捕獲中唾液中的中的CYPA，從而用于相關子宮內膜 癌篩查。利用本發明的核酸適體，具有高靈敏、成本低、易制備、易保存的優點。本發明具有 很高的應用價值。

具體實施方式

以下的實施例便于更好地理解本發明，但并不限定本發明。下述實施例中的實驗 方法，如無特殊說明，均為常規方法。

實施例1CYPA蛋白的獲得

將Genbank：NP_066953所示的CYPA基因通過本領域常規的真核表達方式進行表 達，獲得了相應的目的多肽蛋白。

實施例2核酸適體的篩選和制備

設計兩端包含大約20個核苷酸、中間包括個核苷酸的隨機核酸文庫如下：

5‘-ATCGTCACCATGGATACATG(N39)TTGCACAATTGGACAGTTAC-3’；N39代表39個隨機核 苷酸。