[發明專利]miR-125b-5p抑制劑及其在抑制分枝桿菌中的應用

在審

• 申請號: 201610349009.2
• 申請日: 2016-05-23
• 公開（公告）號: CN107412767A
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 沈洪波;梁姍姍;莫筱衛;陳維政;陳曉慶
• 申請（專利權）人: 上海大學;中國科學院上海巴斯德研究所
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K31/7088;A61P31/04;A61P31/06;C12Q1/02;C12R1/32;C12R1/34
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司31266
• 代理人: 崔佳佳,馬莉華

技術領域

本發明涉及藥物領域，更具體地涉及一種miR-125b-5p抑制劑及其在抑制分枝桿菌中的應用。

背景技術

結核病是由結核分枝桿菌引起的嚴重危害人類健康的重大傳染病。據世界衛生組織的最新統計數據顯示，2014年有960萬新增結核病患者，130萬人死于結核病。據估計，目前全球約有1/3的人口感染了結核分枝桿菌，其中5％-10％將發展成為活動性結核病。艾滋病毒攜帶者，營養不良或糖尿病等免疫系統受損者，以及經常吸煙者，他們的患病風險將增加很多。結核病的治療主要依賴抗生素，而且治療周期相當漫長，導致耐藥性菌株大量出現和擴散。WHO強調發現耐藥結核病幾乎在所有接受調查的國家都存在。同時，結核和艾滋等其他感染病的合并感染日益存在，導致結核病的防治形勢越來越嚴峻。在新的抗結核藥物出現前，開發新的免疫療法，對結核的治療，尤其是耐多藥結核的治療，是一個必要的輔助治療措施。

國內外的研究表明，結核分枝桿菌感染過程中，會引起宿主細胞，血漿中miRNA表達量的變化。miRNA作為一種潛在的診斷標志物，可以用于臨床結核病的診斷。2011年，徐福亮等研究員通過生物芯片的方法比較健康人和活動性結核病人外周血細胞中多個miRNA的表達量，發現很多miRNA的表達量都存在差異，為了進一步確定miRNA的表達量差異，挑選了差異顯著的幾個miRNA用RT-qPCR的方法進行驗證，證明人外周血細胞中miR-29a很有可能作為活動性結核病診斷的分子標志物。結核分枝桿菌感染也會引起唾液中miRNA表達量的改變。結核病的易感性與遺傳有關系。Maertzdorf等研究員在人的全血中發現4種miRNA在活動性結核病和類肉狀瘤病表達量不同。這些生物標志物的發現有助于研究miRNA在抗結核免疫中的作用，同時也有望開發診斷試劑盒。

有趣的是，miRNA與基因表達有密切的調控關系，這種關系體現在不同的 信號通路中。IFN-γ、TNF-α和促使白細胞進入肺的趨化因子在抗結核感染中發揮重要的作用。TNF-α在結核分枝桿菌感染和潛伏感染中有重要的免疫作用。致病的結核分枝桿菌感染與非致病的結核分枝桿菌感染對誘導巨噬細胞中TNF-α的分泌有不同的影響。miR-155與肌醇磷酸酶SHIP1mRNA的3’UTR結合，抑制其翻譯，同時SHIP1蛋白負反饋調節TNF-α的分泌。研究發現有毒結核分枝桿菌和恥垢分枝桿菌細胞壁的成分不同，誘導巨噬細胞中miRNA的表達量也不同。Ma等人用結核分枝桿菌感染miR-29缺失的小鼠，結果發現小鼠肺組織中載菌量減少，對結核菌抵抗力增強。類似的Dorhoi等人敲除小鼠的miR-223，結果小鼠對結核分枝桿菌變得易感，組織損傷嚴重，肺組織中載菌量增加，小鼠死亡率高。這些結果都表明miRNA在抗結核免疫過程中發揮重要的作用。

目前，關于miRNA抗結核的研究仍有不足，本領域迫切需要開發能夠抑制結核分枝桿菌的miRNA相關產品。

發明內容

本發明的目的在于提供一種miR-125b-5p抑制劑及其在抑制分枝桿菌中的應用。

在本發明的第一方面，提供了一種miR-125b-5p抑制劑的用途，用于制備一制劑或組合物，所述制劑或組合物用于(i)治療結核病，和/或(i i)抑制分枝桿菌感染。

在另一優選例中，所述的結核病包括耐藥性結核病，尤其是耐多藥結核病。

在另一優選例中，所述的分枝桿菌包括結核分枝桿菌。

在另一優選例中，所述的分枝桿菌包括致病性結核分枝桿菌與非致病性結核分枝桿菌。

在另一優選例中，所述的分枝桿菌選自下組：卡介苗(BCG)、結核分枝桿菌(M.tuberculosis)、和恥垢分枝桿菌(mycobacterium smegmatis)。

在另一優選例中，所述的分枝桿菌感染為胞內分枝桿菌感染。

在另一優選例中，所述的抑制分枝桿菌感染包括殺滅分枝桿菌。

在另一優選例中，所述miR-125b-5p抑制劑殺滅胞內分枝桿菌的殺菌率為30％-99％，較佳地為40％-80％，更佳地為50-60％。

在另一優選例中，所述的miR-125b-5p的序列如SEQ ID NO.:1所示。

在另一優選例中，所述的miR-125b-5p抑制劑包括：反義寡核苷酸(AMO)、鎖核酸(LNA)、miRNA海綿、miRNA屏障、或其組合。

在另一優選例中，所述的miR-125b-5p抑制劑的序列如SEQ ID NO.:2所示。

在另一優選例中，所述的分枝桿菌感染為人或非人哺乳動物的分枝桿菌感染。