[發(fā)明專利]一種月光棗的組培快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610348276.8
• 申請日: 2016-05-24
• 公開（公告）號: CN105918129B
• 公開（公告）日: 2018-04-17
• 發(fā)明（設計）人: 雷軍強;韋穎婷;覃穩(wěn)梅;李玉秋;莫曉君;韋倩梅
• 申請（專利權(quán)）人: 象州縣科學技術(shù)局
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙)11350
• 代理人: 羅保康

1.一種月光棗的組培快繁方法，其特征在于，步驟如下：

(1)外植體的建立：于5月中旬,剪取2年生棗頭枝，剪去嫩梢段和基部老化部分，留半木質(zhì)化莖段，用自來水沖洗15分鐘后，于質(zhì)量濃度為0.4%洗衣粉溶液中浸泡12-15分鐘，再用自來水沖洗干凈，然后用質(zhì)量濃度為75%的酒精浸泡35s，無菌水沖洗5-6次，瀝干水分，用質(zhì)量濃度為1.0%的次氯酸鈉溶液消毒10-12分鐘，然后用無菌水沖洗7-8次，用鑷子夾取清洗好的莖段，在無菌操作臺上，用滅菌過的濾紙吸干表面水分，剪取1.5—2.5cm 的帶芽莖段作為外植體；

（2）啟動培養(yǎng)：將滅菌后的外植體接種到經(jīng)高溫滅菌的啟動培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為溫度 27～28℃ ,光照強度為2100-2300lx，光照時間17h/d，在培養(yǎng)室中無菌培養(yǎng)24-26天后，將沒有染菌的材料切成帶 1～2個芽的莖段接種于分生培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分生培養(yǎng)基的成分為：MS+ N⁶芐基腺嘌呤2.0mg/L+萘乙酸0.35-0.40mg/L +維生素H 1.5mg/L+甘氨酸1.8-1.9mg/L+1%白砂糖+3%糖蜜+瓊脂7g/L，培養(yǎng)基pH 值為6.1；在光照強度為2300-2500lx，光照時間16h/d，溫度為26-27℃的條件下，培養(yǎng)30-35天；

（3）繼代培養(yǎng)：將植株莖段轉(zhuǎn)接入經(jīng)消毒后的繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為26-28℃，光照強度2400～2600lx ，光照時間為16h/d的條件下培養(yǎng)30-33d；

（4）生根培養(yǎng)：在無菌條件下，剪取長2-2.5cm繼代培養(yǎng)得到的帶葉莖段，插入生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)；培養(yǎng)溫度26～28℃，光強2100～23001x，光照時間15h/d；

（5）煉苗：當經(jīng)過生根培養(yǎng)后的生根試管苗根長 1.0～2.0 cm時，將組培苗進行室內(nèi)煉苗，煉苗溫度為：26-28℃，光照強度為4500-6500lx，室內(nèi)瓶煉5天后，敞口煉苗5-7天；

（6）移栽：取出試管苗，洗凈根上的培養(yǎng)基，移栽到用重量濃度為0.2%KMnO₄溶液消毒過的椰糠+細河沙+草炭按照2-3:5-6:1的比例做基質(zhì)的營養(yǎng)杯中，澆足水，保持空氣濕度為85％-90%，溫度 26～28℃，避免陽光直射，35-38天后，移出溫室進行全光照煉苗7-10d，及時澆水，然后移栽大田；

所述步驟（2）中的啟動培養(yǎng)基的成分為：MS+ N⁶芐基腺嘌呤1.35mg/L +萘乙酸0.25-0.28mg/L +維生素C 1.1mg/L +1%白砂糖+2.5%糖蜜+瓊脂6-7g/L，培養(yǎng)基pH 值為 6.1；

所述步驟（3）中繼代培養(yǎng)基的成分為：MS+ N⁶芐基腺嘌呤2.1mg/L+萘乙酸0.42mg/L +維生素C 0.5-0.8mg/L+維生素H 1.6-1.8mg/L+甘氨酸1.7mg/L+1%白砂糖+3%糖蜜+瓊脂7g/L，培養(yǎng)基pH 值為6.1-6.2；

所述步驟（4）中生根培養(yǎng)基的成分為：1/2MS+ NAA 0.03-0.04mg/L+ IAA 0.16-0.18mg/L+IBA 0.8mg/L+1%白砂糖+3.5%糖蜜+瓊脂8g/L, pH=6.2。