[發明專利]一種基于石墨炔甲苯胺藍復合材料的真菌毒素免疫傳感器的制備方法及應用有效

申請號：	201610342904.1	申請日：	2016-05-23
公開（公告）號：	CN106053789B	公開（公告）日：	2017-11-07
發明（設計）人：	任祥;魏琴;杜斌;王耀光;張勇;孫旭;范大偉	申請（專利權）人：	濟南大學
主分類號：	G01N33/543	分類號：	G01N33/543;G01N27/26
代理公司：	濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業)37240	代理人：	李茜
地址：	250022 ***	國省代碼：	山東;37
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種基于石墨甲苯復合材料真菌毒素免疫傳感器制備方法應用
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及一種基于石墨炔@甲苯胺藍Gy@TB復合材料的真菌毒素免疫傳感器的制備方法及應用，采用石墨炔@甲苯胺藍Gy@TB復合材料作為檢測基底材料，增強導電性的同時，又使得信號分子甲苯胺藍成功固定在傳感表面上。羥丙基殼聚糖的使用，既穩固了基底材料，又使得抗體分子通過戊二醛成功交聯在傳感表面上，實現了真菌毒素免疫傳感器的構建，屬于新型功能材料與生物傳感檢測技術領域。

背景技術

真菌毒素是真菌在食品或飼料里生長所產生的代謝產物，對人類和動物都有害。食用真菌毒素污染的食品，會導致白細胞缺乏病，嚴重者會導致癌變。所以，對于食品中真菌毒素的檢測，刻不容緩。

目前已有的真菌毒素的檢測方法很多，但是大多都是需要大型設備和專業的操作人員。電化學免疫傳感器，因其操作方便，簡單易行，可以實施在線檢測等特點，能夠適用于食品藥品中真菌毒素的測試。

本發明采用石墨炔與甲苯胺藍良好的π-π共軛作用形成的復合材料為基底材料，實現了信號分子的高通量負載，通過羥丙基殼聚糖的修飾，減少了因結合不穩定造成的信號誤差。實現了對真菌毒素的靈敏檢測。該方法具有成本低、特異性好、操作方便、檢測快速等優點，而且制備過程較為簡單，有效克服了目前真菌毒素檢測方法的不足。

發明內容

本發明的目的之一是基于石墨炔@甲苯胺藍Gy@TB復合材料為基底材料，構建了一種無酶無標記，超靈敏的電化學免疫傳感器。

本發明的目的之二是將所構建的傳感器用于真菌毒素的檢測，實現了對多種真菌毒素的超靈敏檢測。

本發明的目的之三是將所構建的傳感器用于食品藥品等實際樣品中真菌毒素的檢測，實現了靈敏檢測。

本發明的技術方案如下：

1. 一種基于石墨炔甲苯胺藍復合材料的真菌毒素免疫傳感器的制備方法及應用（1）用Al₂O₃拋光粉將直徑4 mm的玻碳電極打磨平滑，超純水清洗干凈；將5 ~ 8 μL、0.4 ~ 4 mg/mL石墨炔@甲苯胺藍Gy@TB復合材料滴加到電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干成膜；

（2）滴加3 ~ 8 μL，質量分數為0.1% ~ 5%的羥丙基殼聚糖在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干；

（3）滴加1 ~ 5 μL，質量分數為0.1% ~ 1%的戊二醛水溶液在電極表面，超純水沖洗，室溫下晾干；

（4）依次滴加5 ~ 8 μL真菌毒素抗體，5 ~ 8 μL、質量分數為0.5% ~ 3%的牛血清白蛋白BSA溶液于電極表面，超純水沖洗，4℃冰箱中晾干；

（5）滴加5 ~ 8 μL、0.06 ~ 40 ng/mL的一系列不同濃度的真菌毒素抗原標準溶液至電極表面，超純水沖洗，4℃冰箱中晾干。

2. 石墨炔@甲苯胺藍Gy@TB復合材料的制備

將1 ~10 mg的石墨炔Gy和0.5 ~ 5 mg的甲苯胺藍TB加入0.5 ~ 5 mL的超純水中，室溫振蕩24 h，得到復合材料石墨炔@甲苯胺藍Gy@TB。