[發(fā)明專利]一種白酒中吡嗪類化合物的高效液相色譜檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610328926.2
• 申請日: 2016-05-18
• 公開（公告）號: CN105842377B
• 公開（公告）日: 2018-03-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 龍四紅;孫棣;廖妍儼;馮永渝;田志強;尋思穎;趙貴斌;楊敏;黃家?guī)X;楊波
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/74;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京聯(lián)創(chuàng)佳為專利事務(wù)所(普通合伙)11362
• 代理人: 張梅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種白酒中吡嗪類化合物的高效液相色譜檢測方法，屬于白酒檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

吡嗪是一種1，4位含氮類的六元雜環(huán)化合物，它的衍生物廣泛存在于天然和發(fā)酵食品中。近年來對白酒中風(fēng)味物質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn)雖然吡嗪類化合物在白酒中的含量甚微，但其具有風(fēng)味閾值低，香氣透散性好，并對其它香味物質(zhì)有明顯的烘托疊加作用等特點，對白酒的風(fēng)味起著重要的作用。白酒中的四甲基吡嗪(川芎嗪)由美拉德反應(yīng)生成，在制曲和堆積發(fā)酵的過程中產(chǎn)生，經(jīng)蒸餾帶入酒中，具有擴張血管、改善微循環(huán)及抑制雪小板集聚等作用，賦予中國白酒健康功能。所以對白酒中吡嗪類化合物的分析檢測顯得尤為重要。

目前國內(nèi)外對吡嗪類化合物的分離方法主要有液液萃取，真空濃縮后液液萃取，固相萃取，離子交換和超臨界萃取等。研究結(jié)果主要有王莉等人建立了一種利用氣相色譜-質(zhì)譜-離子掃描聯(lián)用(GC/MS-SIM)技術(shù)，該方法只定量分析了白酒中4種重要化合物；張艷紅等人采用SPME與GC/FTD相結(jié)合的方法，定量了8種吡嗪類化合物；李建飛等人建立了SPME-GC-MS-SIM聯(lián)用檢測白酒中含氮類化合物。然而，以上方法需要大量的有機試劑，樣品用量大，且步驟過于繁瑣，預(yù)處理過程中被分析物損失較大，對于白酒中吡嗪的高效液相色譜-熒光檢測器的檢測方法，未見報道。

因此，建立一種操作簡單，準(zhǔn)確性高和重復(fù)性能夠得到保證的檢測白酒中8種吡嗪類化合物的方法，有重要的現(xiàn)實意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，提供一種白酒中吡嗪類化合物的高效液相色譜檢測方法，即建立高效液相色譜-熒光檢測器分析中國白酒中吡嗪類化合物的方法，用于我國白酒中吡嗪類化合物的分析，本發(fā)明方法能夠同時測定白酒中8種吡嗪類化合物，不需要衍生化、對吡嗪同分異構(gòu)體的分離不需要使用手性柱或手性添加劑，方法前處理簡單，靈敏度高，重復(fù)性好。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種白酒中吡嗪類化合物的高效液相色譜檢測方法，包括下述步驟：

色譜條件：色譜柱：苯基柱Gemini 5μC₆－Phenyl 110A 250mm×4.6mm；流動相由流動相A和流動相B組合進(jìn)行梯度洗脫，流動相A：pH＝1.8～2.3的含磷酸水溶液；流動相B：乙腈；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL；

熒光檢測器條件：Ex＝280nm，Em＝348nm；

對照溶液的配制：分別精確稱取2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2-乙基-6-甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2,3-二甲基-5-乙基吡嗪對照品，用乙醇溶解定容，得標(biāo)準(zhǔn)儲備液；

供試品溶液的制備：取酒樣于具塞離心管中，調(diào)pH為14，加NaCl將其飽和，乙醚振蕩萃取，收集乙醚層，水浴揮至適量，水定容，過0.45μm濾膜，HPLC-FLD進(jìn)樣分析；

用外標(biāo)法定量計算2-甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2-乙基-6-甲基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2,3-二甲基-5-乙基吡嗪8種吡嗪化合物的濃度。

具體地說，前述的白酒中吡嗪類化合物的高效液相色譜檢測方法，包括下述步驟：

色譜條件：色譜柱：苯基柱Gemini 5μC₆－Phenyl 110A 250mm×4.6mm；流動相由流動相A和流動相B組成，流動相A：pH＝1.8～2.3的含磷酸水溶液；流動相B：乙腈；梯度洗脫流動相設(shè)置：按體積計算，0min：含流動相A 95％，流動相B 5％；6min：流動相A 95％，流動相B 5％；6.1min：流動相A 1％，流動相B 99％；12min：流動相A 1％，流動相B 99％；12.1min：流動相A 83％，流動B 17％；12.1min：流動相A 83％，流動B 17％；12.1min：流動相A 83％，流動B 17％；16min：流動相A 83％，流動B 17％；16.1min：流動相A 95％，流動B 5％；25min：流動相A 95％，流動B 5％；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL；

熒光檢測器條件：Ex＝280nm，Em＝348nm；