[發明專利]柯薩奇病毒A6病毒樣顆粒在昆蟲細胞中的制備及其應用

有效

• 申請號: 201610327205.X
• 申請日: 2016-05-17
• 公開（公告）號: CN107384943B
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發明（設計）人: 黃忠;沈超云;劉慶偉;張偉
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海巴斯德研究所
• 主分類號: C12N15/41
• 分類號: C12N15/41;C12N15/866;C12N7/04;A61K39/125;A61P31/14
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 陳詳;劉妍珺

1.一種分離的經密碼子優化的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸編碼柯薩奇A6病毒P1蛋白；并且所述多核苷酸為序列如SEQ ID NO.3所示的多核苷酸。

2.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體含有權利要求1所述的多核苷酸。

3.如權利要求2所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體還包括編碼柯薩奇A6病毒3CD蛋白的多核苷酸序列。

4.如權利要求2所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體包括第一表達盒和第二表達盒，所述第一表達盒包括SEQ ID NO.3所示的多核苷酸或其互補序列；所述第二表達盒包括SEQ ID NO.6所示的多核苷酸或其互補序列。

5.如權利要求2所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體為重組桿狀病毒。

6.如權利要求4所述的表達載體，其特征在于，所述第一表達盒還包括啟動子，所述啟動子位于SEQ ID NO.3所示的多核苷酸的上游；和/或，所述第二表達盒還包括啟動子，所述啟動子位于SEQ ID NO.6所示的多核苷酸的上游。

7.如權利要求6所述的表達載體，其特征在于，所述啟動子位于SEQ ID NO.3所示的多核苷酸的上游，并且所述啟動子為AcMNPV p10啟動子。

8.如權利要求6所述的表達載體，其特征在于，所述啟動子位于SEQ ID NO.6所示的多核苷酸的上游，并且所述啟動子為polyhedrin啟動子。

9.一種宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞含有權利要求2所述的表達載體，或者在基因組中整合有權利要求1所述的多核苷酸。

10.一種柯薩奇病毒A6病毒樣顆粒(VLP)，其特征在于，所述病毒樣顆粒由權利要求9所述的宿主細胞表達。

11.一種制備柯薩奇病毒A6 VLP的方法，其特征在于，包括步驟：

在適合表達的條件下，培養權利要求9所述的細胞，從而表達出權利要求10所述的病毒樣顆粒(VLP)；和

分離所述病毒樣顆粒(VLP)。

12.一種藥物組合物，其特征在于，所述的組合物含有權利要求4所述的病毒樣顆粒(VLP)、權利要求1所述的多核苷酸或者權利要求2所述的表達載體或者權利要求3所述的宿主細胞，以及藥學上可接受的載體和/或輔料。

13.如權利要求12所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括疫苗組合物。

14.如權利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，所述的疫苗組合物還含有佐劑。

15.如權利要求14所述的藥物組合物，其特征在于，所述的佐劑包括氧化鋁、皂苷、quilA、胞壁酰二肽、礦物油或植物油、基于囊泡的佐劑、非離子嵌段共聚物或DEAE葡聚糖、細胞因子。