[發明專利]一種利用適配體檢測黃曲霉毒素B1或M1的試紙條有效
| 申請號: | 201610325660.6 | 申請日: | 2016-05-17 |
| 公開(公告)號: | CN105784990B | 公開(公告)日: | 2018-06-01 |
| 發明(設計)人: | 陳愛亮;朱超;張桂蘭;黃亞飛;閆嬌;白文薈 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所 |
| 主分類號: | G01N33/533 | 分類號: | G01N33/533;G01N33/558 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢;白艷 |
| 地址: | 100081 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 黃曲霉毒素 適配體 檢測 包被 標記物墊 檢測探針 質控探針 反應膜 檢測區 偶聯物 試紙條 質控區 試紙 互補單鏈DNA 生物素標記 樣品吸收墊 熒光素標記 分子形成 核苷酸序 特異性強 載體蛋白 靈敏度 半抗原 親和素 吸水墊 偶聯 | ||
1.一種檢測黃曲霉毒素B1和M1的試紙,包括樣品吸收墊、標記物墊、反應膜和吸水墊;
所述標記物墊包被檢測探針,所述檢測探針為5’端熒光素標記的黃曲霉毒素B1適配體;所述黃曲霉毒素B1適配體的核苷酸序列為序列1;
所述反應膜包括檢測區和質控區;
所述檢測區包被黃曲霉毒素B1半抗原與載體蛋白形成的偶聯物;
所述質控區包被質控探針,所述質控探針的核苷酸序列為所述適配體的互補序列;所述黃曲霉毒素B1半抗原能與所述黃曲霉毒素B1適配體結合;
所述質控探針的5’末端標記生物素,且通過鏈酶親和素與其上的生物素偶聯形成共價鍵包被在反應膜上;
所述載體蛋白為卵清白蛋白或牛血清白蛋白;
所述熒光素為Cy5。
2.根據權利要求1所述的試紙條,其特征在于:
所述試紙中還包括底板,且所述樣品吸收墊、所述標記物墊、所述反應膜和所述吸水墊順次固定在所述底板上。
3.權利要求1或2所述的試紙條在檢測黃曲霉毒素B1和M1中的應用。
4.權利要求1或2所述的試紙條在制備檢測黃曲霉毒素B1和M1產品中的應用。
5.權利要求1或2所述的試紙條在待測樣品中檢測黃曲霉毒素B1和M1含量中的應用。
6.權利要求1或2所述的試紙條在制備待測樣品中檢測黃曲霉毒素B1和M1含量產品中的應用。
7.一種檢測待測樣品中黃曲霉毒素B1和M1含量的方法,包括如下步驟:
(1)用權利要求1或2所述的試紙條檢測黃曲霉毒素B1和M1標準品,得到標準品在所述試紙的檢測區和質控區的熒光信號比值,制作黃曲霉毒素B1和M1標準品的濃度對應熒光信號比值的一元線性回歸曲線,計算回歸方程;
(2)將所述黃曲霉毒素標準品替換為待測樣品,用所述試紙檢測待測樣品,得到待測樣品在所述試紙的檢測區和質控區的熒光信號比值,根據步驟(1)的回歸方程,得到所述待測樣品中黃曲霉毒素的含量。
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