[發(fā)明專利]一種抑制核型多角體病毒的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610324239.3
• 申請(qǐng)日: 2016-05-16
• 公開（公告）號(hào): CN107384919B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃勇平;譚安江;陳樹清
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院分子植物科學(xué)卓越創(chuàng)新中心
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N15/63;A01K67/033
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種非疾病診斷治療目的的抑制核型多角體病毒的方法，其特征在于，所述的方法包括：以核型多角體病毒的ie-1基因和me53基因作為靶標(biāo)，利用CRISPR/Cas系統(tǒng)介導(dǎo)的基因組編輯方法切割病毒基因組，從而抑制核型多角體病毒；其中，以核型多角體病毒的ie-1基因中GTGAACCAACCATCGGCAGC和GAGTCAAATATTAAAGTATT作為切割的靶標(biāo)；以核型多角體病毒的me53基因中GCAAAGTGTTTGAAATAATT和GTGCACCAGACCCGACGCGG作為切割的靶標(biāo)；所述的核型多角體病毒是家蠶核型多角體病毒。

2.一種抑制昆蟲的核型多角體病毒感染的核酸構(gòu)建體，其特征在于，所述核酸構(gòu)建體包括操作性連接的：Cas9表達(dá)盒，sgRNA表達(dá)盒；

其中，所述的sgRNA表達(dá)盒包括：靶向核型多角體病毒的ie-1基因的sgRNA表達(dá)盒，以及靶向核型多角體病毒的me53基因的表達(dá)盒；

其中，所述的靶向核型多角體病毒的ie-1基因的sgRNA表達(dá)盒靶向ie-1基因中SEQ IDNO: 4所示序列和SEQ ID NO: 5所示序列；所述的靶向核型多角體病毒的me53基因的表達(dá)盒靶向me53基因中SEQ ID NO: 6所示序列和SEQ ID NO: 7所示序列。

3.如權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體，其特征在于，所述的靶向核型多角體病毒的ie-1基因的sgRNA表達(dá)盒中，以U6-2小核RNA基因的啟動(dòng)子作為啟動(dòng)子。

4.如權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體，其特征在于，所述的靶向核型多角體病毒的me53基因的sgRNA表達(dá)盒中，以U6-2小核RNA基因的啟動(dòng)子作為啟動(dòng)子。

5.如權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體，其特征在于，所述的Cas9表達(dá)盒中，采用IE1啟動(dòng)子作為啟動(dòng)子。

6.如權(quán)利要求5所述的核酸構(gòu)建體，其特征在于，還采用SV40作為終止子。

7.權(quán)利要求2-6任一所述的核酸構(gòu)建體的用途，用于制備具有抑制核型多角體病毒的能力的昆蟲。

8.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述的核型多角體病毒是家蠶核型多角體病毒。

9.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述的昆蟲是能被核型多角體病毒感染的昆蟲。

10.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于，所述的昆蟲是家蠶。

11.一種制備具有抑制核型多角體病毒的能力的昆蟲的方法，其特征在于，所述方法包括：將權(quán)利要求2-6任一所述的核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)入昆蟲的體內(nèi)，從而獲得具有抑制核型多角體病毒的能力的昆蟲。