[發(fā)明專利]一種具有抗氧化活性的紅松籽肽及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610321481.5
• 申請日: 2016-05-15
• 公開（公告）號: CN105753942B
• 公開（公告）日: 2019-04-12
• 發(fā)明（設計）人: 林松毅;楊睿雯;葉海清
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/16
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 劉世純;王恩遠

本發(fā)明屬于農副產品精深加工及其副產物綜合利用的技術領域，涉及一種具有抗氧化活性的紅松籽肽及其制備方法，利用排阻色譜法和高效液相色譜質譜聯(lián)用儀(HPLC?MS/MS)從3～10kDa紅松籽肽中鑒定出抗氧化肽，其特征在于，氨基酸序列是Phe?Thr?Gly?Ser?Lys(FTGSK)，分子量538.61，純度為97％以上，該肽序列在濃度1mg/mL～3mg/mL具有DPPH自由基清除率為16％～50％，其電位經過納米粒度儀測定得出為18mV～30mV，其二級結構經過傅里葉紅外光譜儀(FTIR)和圓二色譜儀(CD)測定后得出，含有的官能團有?OH，＝C?H，C＝O，C＝C，C?N，C?S；α?螺旋含量為1％～3％，β?折疊含量為45％～46％，β?轉角含量為20％～24％，無序結構含量為24％～27％。

技術領域

本發(fā)明屬于農副產品精深加工及其副產物綜合利用的技術領域，涉及一種具有抗氧化活性的紅松籽肽及其制備方法，利用排阻色譜法和高效液相色譜質譜聯(lián)用儀(HPLC-MS/MS)從3～10kDa紅松籽肽中鑒定出抗氧化肽，其特征在于，氨基酸序列是Phe-Thr-Gly-Ser-Lys(FTGSK)，分子量538.61，純度為97％以上，該肽序列在濃度1mg/mL～3mg/mL具有DPPH自由基清除率為16％～50％，其電位經過納米粒度儀測定得出為18mV～30mV，其二級結構經過傅里葉紅外光譜儀(FTIR)和圓二色譜儀(CD)測定后得出，含有的官能團有-OH，＝C-H，C＝O，C＝C，C-N，C-S；α-螺旋含量為1％～3％，β-折疊含量為45％～46％，β-轉角含量為20％～24％，無序結構含量為24％～27％。

背景技術

目前，紅松籽廣泛應用于主菜，小吃等的制作，由于具有美容養(yǎng)顏，健腦益智的功效，在市場中頗受女性及中老年人群的歡迎。紅松籽富含油脂和蛋白質，除此之外，還含有維他命，多酚組分等等。近幾年來，研究者都將目光集中于紅松籽油的研究，而紅松籽蛋白的研究相對較少。另外，紅松籽制油后廢棄了大量的松子粕，采用松子粕為原料開發(fā)蛋白制品可以說是滿足了環(huán)境友好型社會的要求，而且價格低廉，可進行工業(yè)化生產，因此具有廣闊前景。近年來，抗氧化肽是研究熱點，因為抗氧化肽除了具有清除體內自由基的功能，還具有防輻射，抗衰老等其他生物活性，因此抗氧化肽除了在功能性食品、保健食品方面有廣泛應用，還可以應用于醫(yī)藥和化妝品等方面。

目前，很多抗氧化肽從動植物蛋白中鑒定出來，比如，從螺旋藻中鑒定的肽序列LAHICGVP，具有·OH清除能力；從大米中鑒定的肽序列FRDEHKK，KHDRGDEF，具有抑制脂質自動氧化，清除DPPH、·OH、O₂^-·的能力；從火麻仁中鑒定出的肽序列FLKLTAER，具有Fe²⁺螯合能力和清除DPPH、·OH、O2-·的能力，從草魚中鑒定出肽序列PSKYEPFV，具有清除O₂^-·的能力，等等。相關研究表明，紅松籽蛋白酶解物具有免疫活性和抗氧化活性，本發(fā)明提供了一種具有抗氧化活性的紅松籽肽的制備方法。

在本專利中，DPPH清除率，電位穩(wěn)定性，含有的官能團和二級結構含量，由于操作簡單，準確度和精確度高，被用來作為抗氧化肽的評價指標。DPPH清除率越高，即代表抗氧化活性越強，電位通常用表示溶液中帶電粒子的表面電荷，且電位的絕對值越大則溶液的穩(wěn)定性則越大。二級結構包括α-螺旋，β-折疊，β-轉角以及無序結構。本發(fā)明對于紅松籽產品多樣化、紅松籽生物活性肽在功能性食品、保健食品或者藥品中的開發(fā)利用具有重要的意義。

本發(fā)明的技術優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下三個方面：

第一，申請專利提供一條新的抗氧化肽序列Phe-Thr-Gly-Ser-Lys(FTGSK)，可廣泛應用于功能性食品、保健食品等方面。

第二，申請專利的原料創(chuàng)新。是以3～10kDa紅松籽肽為原料。