[發(fā)明專利]一種miR-638在急性髓系白血病化療中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610320944.6
• 申請(qǐng)日: 2016-05-13
• 公開（公告）號(hào): CN105748502A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭明雄;何名揚(yáng);林義;周微微
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢大學(xué)深圳研究院
• 主分類號(hào): A61K31/7105
• 分類號(hào): A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/02
• 代理公司: 廣東德而賽律師事務(wù)所 44322
• 代理人: 費(fèi)錦生

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子腫瘤細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域，涉及一種靈長類特異的非編碼微小RNA——hsa-miR-638(以下稱為miR-638)在急性髓系白血病化療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一類長約22個(gè)核苷酸(nt)的單鏈小分子RNA，主要通過抑制蛋白翻譯或破壞靶基因轉(zhuǎn)錄本穩(wěn)定性而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)。隨著越來越多的miRNAs在人類細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，其在發(fā)育、細(xì)胞增殖和死亡過程等方面所發(fā)揮的廣泛調(diào)控作用也被揭示。許多研究證明，miRNAs在不同的惡性腫瘤中有不同的表達(dá)譜，并揭示了多種miRNAs分子通過沉默癌細(xì)胞生長相關(guān)基因的表達(dá)，參與了癌細(xì)胞生長代謝的調(diào)控，間接地起著“促癌和抑癌基因”的作用。miRNAs表達(dá)水平在腫瘤發(fā)生前后存有較大差異，這種差異表達(dá)在腫瘤診斷、治療療效及預(yù)后評(píng)估中起著重要作用。惡性腫瘤是經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國家的主要死亡原因，在發(fā)展中國家則占據(jù)死亡原因的第二位。放化療作為腫瘤的主要治療方法之一，其療效受腫瘤細(xì)胞放化療敏感性影響。不同個(gè)體腫瘤的放化療敏感性存在差異。目前隨著眾多學(xué)者對(duì)miRNAs研究的深入，其與腫瘤之間關(guān)系被揭示，與腫瘤放化療敏感性之間的關(guān)系也逐漸清晰。

大量研究表明，miRNAs在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)，調(diào)控腫瘤發(fā)生、發(fā)展、遷移和浸潤，其在腫瘤診斷、治療療效及預(yù)后等方面的作用逐漸被發(fā)現(xiàn)。miR-638是一類與早期人胚發(fā)育相關(guān)的、靈長類特異表達(dá)的miRNAs。我們的前期研究表明：miR-638在正常的髓系血細(xì)胞發(fā)育過程中的表達(dá)呈現(xiàn)上調(diào)趨勢(shì)，且在細(xì)胞系(或AML原代祖細(xì)胞)的體外誘導(dǎo)髓系分化過程中表達(dá)顯著上調(diào)，提示miR-638可能是髓系造血的一個(gè)重要的調(diào)控因子。詳細(xì)的分子機(jī)制和功能研究提示miR-638通過靶向調(diào)控其潛在的靶基因控制著髓系造血分化，為發(fā)展急性髓系白血病的診斷和治療試劑提供了新的靶標(biāo)。部分相關(guān)研究結(jié)果已經(jīng)于2014年申請(qǐng)了國內(nèi)專利(專利申請(qǐng)?zhí)枺?01410466367.2)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種miR-638在急性髓系白血病化療中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種miR-638在急性髓系白血病化療中的應(yīng)用，將miR-638應(yīng)用于制備急性髓系白血病化療的增敏藥物。

優(yōu)選地，miR-638與染色質(zhì)粘連蛋白SMC1A基因3’-UTR區(qū)域直接結(jié)合應(yīng)用于制備急性髓系白血病化療的增敏藥物。

優(yōu)選地，利用常規(guī)的商品化質(zhì)粒pMIR-ReportLuciferase載體，構(gòu)建miR-638靶基因染色質(zhì)粘連蛋白SMC1A基因的篩選系統(tǒng)。

一種miR-638商品化模擬物在急性髓系白血病化療中的應(yīng)用，將miR-638商品化模擬物應(yīng)用于制備急性髓系白血病化療的增敏藥物。

優(yōu)選地，miR-638商品化模擬物與染色質(zhì)粘連蛋白SMC1A基因3’-UTR區(qū)域直接結(jié)合應(yīng)用于制備急性髓系白血病化療的增敏藥物。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果是：

miR-638的過表達(dá)能增加急性髓系白血病細(xì)胞對(duì)化療藥物順鉑的敏感性，表現(xiàn)出更為嚴(yán)重的白血病細(xì)胞DNA損傷程度，增加急性髓系白血病化療的治療效果，減輕患者化療的痛苦。

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。

附圖說明

圖1為miR-638在白血病細(xì)胞系體外誘導(dǎo)分化過程中表達(dá)上調(diào)圖。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)髓系分化指標(biāo)(巨核系：CD41a；單核/巨噬細(xì)胞系：CD14；粒系：CD11b，A～C，上)表達(dá)和實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)(A～C，下)miR-638表達(dá)情況。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，miR-638表達(dá)柱狀圖結(jié)果顯示為“均值±SD”。#，p<0.0001。

圖2為miR-638靶標(biāo)基因SMC1A的證明圖。A、RNAhybrid分析SMC1A的3’-UTR端可能的miR-638的靶向位點(diǎn)。B、雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了轉(zhuǎn)染不同質(zhì)粒和模擬物后的HEK293T細(xì)胞的相對(duì)雙熒光素酶活性。每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，相對(duì)熒光素酶活性柱狀圖結(jié)果顯示為“均值±SD”。*，p<0.05。