[發明專利]一種通過原位分離純化的菌株降解藍藻毒素的方法

在審

• 申請號: 201610320144.4
• 申請日: 2016-05-13
• 公開（公告）號: CN105779361A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 李國;張六六
• 申請（專利權）人: 安徽金農惠民生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產權代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

1.一種通過原位分離純化的菌株降解藍藻毒素的方法，其特征在于：以云南昆明滇池 底泥作為藻毒素降解菌分離源，分離獲得對藻毒素具有高效降解效果的菌株，將云南滇池 中取得的泥樣接種于的牛肉膏蛋白胨培養基中，在自然光照、37℃、120rpm條件下進行搖瓶 培養兩次，然后平板劃線，觀察菌落生長情況；挑取單菌落，進行多次平板分離純化，在純化 過程中逐步提高分離培養基中MCs的濃度進行梯度馴化；經過多次純化后得到純菌株，于4 ℃冰箱中保存；將分離得到的純菌株接種于基礎培養基中，于37℃、120rpm條件下進行搖瓶 培養；定時取樣測定水中MCs的濃度，初步確認分離所得的微生物降解MCs能力的強弱，并選 擇其中的優勢菌株做進一步純化，獲得高效降解MC-LR的菌株，屬于氣單孢菌屬，命名為 Aeromonassp.DC-132。

2.根據權利要求1所述的一種通過原位分離純化的菌株降解藍藻毒素的方法，其特征 在于：所述的平板為染毒涂平板，染毒涂平板以及藻毒素降解率測試所用藍藻毒素為MC- LR、購自Sigma公司、CAS號101043-37-2、分子量995.17。

3.根據權利要求1所述的一種通過原位分離純化的菌株降解藍藻毒素的方法，其特征 在于：所述牛肉膏蛋白胨培養基采用LB液體培養基和LB固體培養基，其中LB液體培養基：細 菌培養用胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl10g、0.2ml的5mol/LNaOH調節pH至7.0，用 去離子水定容至1000ml，在0.1MPa下蒸汽滅菌30min，備用；LB固體培養基：在每100mlLB液 體培養基加入瓊脂1.3g-1.5g，在0.1MPa下蒸汽滅菌30min，冷卻至約45℃-50℃，倒平板，備 用。