[發明專利]用于鑒定脂肪間充質干細胞的試劑盒

有效

• 申請號: 201610312843.4
• 申請日: 2016-05-11
• 公開（公告）號: CN105866431B
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 劉俊江;魯振宇;黃文敬;韓洪起;張冰晶;秦臻;徐悅
• 申請（專利權）人: 天津欣普賽爾生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;C12N5/077
• 代理公司: 天津才智專利商標代理有限公司12108
• 代理人: 王曉紅

1.一種用于鑒定脂肪間充質干細胞的試劑盒，其特征在于，包括流式表型檢測試劑套裝、細胞固定液、普通培養基、成脂分化誘導及檢測試劑套裝、成骨分化誘導及檢測試劑套裝、成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝；

所述流式表型檢測試劑套裝：包括CD73抗體、CD90抗體、CD105抗體、CD34抗體、CD45抗體、CD49d抗體、CD106抗體、IgG1抗體，每只均為200uL；

所述成脂分化誘導及檢測試劑套裝：包括100mL成脂誘導培養基和10mL成脂分化檢測試劑，成脂誘導培養基為含有0.2-2mmoL/L谷氨酰胺、1-20μg/mL IGF-2、2-5mmol/L 3-磷酸甘油、0.25-1mmoL/L倍氯米松、0.1-0.5mmoL/L異丁基甲基黃嘌呤、100-200μmoL/L吲哚美辛、1-50μmoL/L乙酰CoA、體積分數2-10％胎牛血清的AMEM培養基；

所述成骨分化誘導及檢測試劑套裝：包括100mL成骨誘導培養基和10mL成骨分化檢測試劑，成骨誘導培養基為含有0.5-2mmoL/L谷氨酰胺、0.5-2mmoL/L倍氯米松、5-20μg/mL TGF-β、2-10mmol/Lβ-甘油磷酸鈉、15-25mmol/L維生素D3、20-30mmol/L維生素C、體積分數2-10％胎牛血的AMEM培養基；

所述成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝：包括100mL成軟骨誘導培養基和10mL成軟骨分化檢測試劑，成軟骨誘導培養基為含有5-10ng/ml TGF-β1、20-50mg/L維生素C、10-20nmol/L倍他米松、50-100mg/ml ITS、10-60mmol/L氨基葡萄糖、1-20mmol/L丙酮酸鈉、2-10ug/mg亞油酸、1-8ng/ml人血清白蛋白、10-20mmol/Lβ-甘油磷酸鈉、體積分數2-10％胎牛血清的AMEM培養基；

所述普通培養基為20mL含體積分數2-8％胎牛血清的AMEM培養基。

2.根據權利要求1所述的用于鑒定脂肪間充質干細胞的試劑盒，其特征在于，所述細胞固定液為20mL質量百分比濃度4％多聚甲醛的水溶液。

3.根據權利要求1所述的用于鑒定脂肪間充質干細胞的試劑盒，其特征在于，所述成骨分化檢測試劑為含有1g/L茜素磺酸鈉水溶液。

4.根據權利要求1所述的用于鑒定脂肪間充質干細胞的試劑盒，其特征在于，所述成脂分化檢測試劑為含有質量體積分數為0.5％油紅O的異丙醇溶液。

5.根據權利要求1所述的用于鑒定脂肪間充質干細胞的試劑盒，其特征在于，所述成軟骨分化檢測試劑為含有10g/L阿爾新蘭、質量體積分數3％醋酸的水溶液。