[發明專利]一種連翹花化學成分指紋圖譜的快速分析方法

有效

• 申請號: 201610305487.3
• 申請日: 2016-05-09
• 公開（公告）號: CN106053704B
• 公開（公告）日: 2017-11-03
• 發明（設計）人: 房信勝;王建華
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種天然產物質量分析技術領域，具體涉及一種連翹花化學成分指紋圖譜的快速分析方法。

背景技術

連翹(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)為木犀科(Oleaceae)連翹屬多年生落葉灌木。連翹的傳統用藥部位為果實，具有清熱解毒，消腫散結，疏散風熱之功效，用于癰疽、瘰疬、乳癰、丹毒、風熱感冒、溫病初起、溫熱入營、高熱煩渴、神魂發斑、熱淋澀痛等癥。連翹作為重要的中藥資源，在臨床和中成藥生產中需求量大。然而由于無序采收和缺乏人工培育，連翹的產量已不能滿足日益增長的需要。尋找新的可替代資源是解決供需矛盾的途徑之一。藥用植物的不同部位可能會具有相似的生物活性和化學成分，因此連翹花也是潛在的藥物資源，值得研究開發。連翹花初春開放，并且存在花柱異型，授粉和結果率低，因此加強對連翹花化學成分的研究有利于促進其開發利用。目前已有研究將連翹花開發為連翹花茶。但關于連翹花化學成分的提取和測定缺乏研究。微波輔助提取作為一種現代技術，具有快速、高效、避免成分降解、節能環保等優點。在中藥有效成分的提取、質量控制等方面具有廣闊的應用前景。化學成分指紋圖譜能全面反映中藥的內在質量，有利于中藥質量控制水平的提高。

發明內容

本發明的目的是提供一種連翹花化學成分指紋圖譜的快速分析方法，該方法能在很短的時間內將連翹花中的多種成分提取出來并完成化學成分指紋圖譜分析。

一種連翹花化學成分指紋圖譜的快速分析方法，包括以下步驟：

1)將新采集的連翹花曬干或烘干，粉碎，過60～120目篩，得到連翹花粉末。

2)以濃度為30％～90％甲醇或30％-80％乙醇水溶液作為溶劑，將連翹花粉末與所述溶劑按照質量體積比1：10～40混合置于微波提取器中，設定微波功率400～1000W，溫度50～70℃，提取1～10min，取出，放至室溫，用所述溶劑補足至提取前連翹花粉末與溶劑的重量(即和提取前稱定的重量一致)，搖勻，取續濾液，作為分析用樣品溶液。

3)采用反相高效液相色譜法進行圖譜分析：色譜條件：色譜柱為C18鍵合硅膠柱，所述C18鍵合硅膠色譜柱的長度為250mm，內徑4.6mm，填料的粒徑為5μm；柱溫為20～35℃；流速為1.00mL/min；進樣體積為10～20μL；檢測波長為270～280nm；梯度洗脫40min，梯度洗脫條件如下：

0min時，流動相A：流動相B＝13：87(體積比)

20min時，流動相A：流動相B＝15：85(體積比)

30min時，流動相A：流動相B＝30：70(體積比)

38min時，流動相A：流動相B＝40：60(體積比)

40min時，流動相A：流動相B＝100：0(體積比)

所述流動相A為乙腈，所述流動相B為濃度0.05～0.1％(體積比)的甲酸水溶液、濃度0.03～0.06％(體積比)的磷酸水溶液或濃度0.10～0.50％(體積比)的醋酸水溶液。

發明首次公開了一種連翹花化學成分指紋圖譜的快速分析方法，該方法采用優化的微波輔助提取法制備樣品，能在短時間內完成；優化的高效液相色譜法能在40min內實現20種以上化學成分的分離。因此本方法是一種快速、高效分析連翹花化學成分指紋圖譜的新方法，有利于連翹花化學成分分析及質量控制水平的提高。

附圖說明

圖1不同連翹花樣品的高效液相色譜指紋圖譜。

由圖1可以看出，在40min內可以對連翹花中化學成分進行有效分離，該發明建立的分析方法適合用于連翹花樣品的化學成分分析和指紋圖譜建立，分析時間短，方法穩定性好。5份樣品的圖譜中發現20個共有色譜峰，各色譜峰峰面積的大小及相互間的比例反應了不同連翹花樣品的質量差異。相比測定一個或幾個化學成分的質量分析方法，該化學成分圖譜更能全面反應連翹花的質量情況。

具體實施方式

(1)將新采集的連翹花曬干或烘干，粉碎，過80目篩得到連翹花粉末。

(2)精密稱取連翹花粉末1g置具塞圓底燒瓶中，加入30mL濃度為70％甲醇水溶液，具塞，精密稱定。置微波輔助提取器中，設定微波功率400W，溫度60℃，提取3min，取出，放至室溫，精密稱定，用濃度為70％的甲醇水溶液補足至提取前稱定的連翹花粉末與甲醇溶液的總重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(也可用濾紙濾過)，續濾液作為分析用樣品溶液。