[發(fā)明專利]一種人干細(xì)胞來源的生物美容原料的制備方法及其產(chǎn)品有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610303514.3 | 申請日: | 2016-05-11 |
| 公開(公告)號: | CN105769740B | 公開(公告)日: | 2019-03-19 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 陳建勛;黃啟明;廖文敏 | 申請(專利權(quán))人: | 紫程瑞生會(北京)生物技術(shù)發(fā)展有限公司 |
| 主分類號: | A61K38/19 | 分類號: | A61K38/19;A61K8/98;A61K8/64;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100176 北京市北京經(jīng)*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 干細(xì)胞 來源 生物 美容 原料 制備 方法 及其 產(chǎn)品 | ||
1.一種人干細(xì)胞來源的生物美容原料的制備方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟,
(1)通過培養(yǎng)人干細(xì)胞獲得干細(xì)胞和培養(yǎng)液;
(2)將干細(xì)胞裂解,加入到培養(yǎng)液獲得蛋白懸液;
(3)將蛋白懸液經(jīng)超濃縮后制備成濃縮液;
任選地,包括如下步驟,
(4)將濃縮液制備成人干細(xì)胞精華液;
任選地,包括如下步驟,
(5)將所述人干細(xì)胞精華液,經(jīng)冷凍干燥后制備成凍干粉;其可長期在-80℃超低溫冰箱保存;
其中,所述步驟(1)中使用MSC無血清培養(yǎng)基,其含0.1-200μg/ml氫化可地松、1-500μg/ml抗壞血酸和1-1000μg/ml人胰島素;
所述濃縮液、人干細(xì)胞精華液或所述凍干粉可為皮膚再生修復(fù)的生物美容原料;
其中,所述人干細(xì)胞培養(yǎng)液、含人干細(xì)胞裂解液的培養(yǎng)液或其濃縮液均富含如下細(xì)胞生長因子:表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、類胰島素生長因子1(insulin-like grouthfactors-1,IGF-1)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血小板衍生生長因子(Platelet derived growth factor,PDGF)和干細(xì)胞生長因子(stemcells factor,SCF),以及細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和中性粒細(xì)胞胞漿因子2(neutrophil cytosolic factor 2,NCF-2);
所述人干細(xì)胞培養(yǎng)液含表皮生長因子含量超過10000pg/ml,堿性成纖維生長因子含量超過10000pg/ml,類胰島素生長因子含量超過4000pg/ml,血管內(nèi)皮生長因子含量超過4000pg/ml,血小板衍生生長因子含量超過7000pg/ml和干細(xì)胞生長因子含量超過2000pg/ml;以及細(xì)胞間粘附分子-1含量超過1000pg/ml和中性粒細(xì)胞胞漿因子2含量超過2000pg/ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述含人干細(xì)胞裂解液的培養(yǎng)液中表皮生長因子含量超過15ng/ml,堿性成纖維生長因子含量超過15ng/ml,類胰島素生長因子含量超過6ng/ml,血管內(nèi)皮生長因子含量超過8ng/ml,血小板衍生生長因子含量超過9ng/ml和干細(xì)胞生長因子含量超過5ng/ml;以及細(xì)胞間粘附分子-1含量超過3ng/ml和中性粒細(xì)胞胞漿因子2含量超過5ng/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA試劑盒檢測,所述人干細(xì)胞培養(yǎng)液、含人干細(xì)胞裂解液的培養(yǎng)液及其濃縮液富含細(xì)胞生長因子;
其中,所述人干細(xì)胞培養(yǎng)液含表皮生長因子含量超過10000pg/ml,堿性成纖維生長因子含量超過10000pg/ml,類胰島素生長因子含量超過4000pg/ml,血管內(nèi)皮生長因子含量超過4000pg/ml,血小板衍生生長因子含量超過7000pg/ml和干細(xì)胞生長因子含量超過2000pg/ml;以及細(xì)胞間粘附分子-1含量超過1000pg/ml和中性粒細(xì)胞胞漿因子2含量超過2000pg/ml,或/和,所述含人干細(xì)胞裂解液的培養(yǎng)液中表皮生長因子含量超過15ng/ml,堿性成纖維生長因子含量超過15ng/ml,類胰島素生長因子含量超過6ng/ml,血管內(nèi)皮生長因子含量超過8ng/ml,血小板衍生生長因子含量超過9ng/ml和干細(xì)胞生長因子含量超過5ng/ml;以及細(xì)胞間粘附分子-1含量超過3ng/ml和中性粒細(xì)胞胞漿因子2含量超過5ng/ml,
或/和,所述濃縮液中表皮生長因子含量超過40ng/ml,堿性成纖維生長因子含量超過40ng/ml,類胰島素生長因子含量超過10ng/ml,血管內(nèi)皮生長因子含量超過20ng/ml,血小板衍生生長因子含量超過25ng/ml和干細(xì)胞生長因子含量超過10ng/ml,以及細(xì)胞間粘附分子-1含量超過6ng/ml和中性粒細(xì)胞胞漿因子2含量超過10ng/ml。
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