[發(fā)明專利]區(qū)分轉(zhuǎn)移性與非轉(zhuǎn)移性肺鱗癌的分子標志物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610301281.3
• 申請日: 2016-05-09
• 公開（公告）號: CN105755154A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊承剛;李曙光;肖武
• 申請（專利權(quán)）人: 北京泱深生物信息技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/68;G01N33/574;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及TEX13B基因在肺鱗癌轉(zhuǎn)移的診斷、治療中的用途。

背景技術(shù)

肺癌按組織學分類一般分為鱗癌、腺癌、大細胞癌和小細胞癌4型，其中以鱗癌最為常見，約占全部肺癌的40％-70％。肺癌是目前最常見的惡性腫瘤之一，其死亡率位居人類惡性腫瘤之首。在世界大多數(shù)國家，肺癌在男性常見惡性腫瘤中占首位，占男性惡性腫瘤死亡的38.03％；在女性，其死亡率已超過乳腺癌成為腫瘤死亡的首要原因。近年來，由于采用了以手術(shù)為主的多學科綜合治療，肺癌的治療效果有了明顯提高。然而，就總體而言，肺癌患者總的5年生存率仍然較低，僅為8.9％-15％。究其原因，主要是多數(shù)患者首次就診時己發(fā)生了遠處轉(zhuǎn)移，即使是預(yù)后最好的I期和II期非小細胞肺癌，手術(shù)后多數(shù)患者仍會死于肺癌復(fù)發(fā)或遠處轉(zhuǎn)移。因此，探討肺癌的分子機理，尋找早期診斷肺癌、預(yù)測轉(zhuǎn)移的生物標記和干預(yù)治療的靶分子，對于肺癌的診斷和治療具有重要的意義。

惡性腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移是腫瘤發(fā)展到晚期的必然結(jié)果和導致患者死亡的主要原因。迄今為止，對腫瘤轉(zhuǎn)移機制的研究尚未獲得突破性的進展。對肺癌的研究也同樣如此。近年來的研究表明，肺癌侵襲轉(zhuǎn)移是一個極其復(fù)雜的多基因調(diào)控的多步驟過程，涉及細胞多個信號通路改變，并經(jīng)過多個階段才最終形成的復(fù)雜生物現(xiàn)象。包括腫瘤細胞離散、遷移、分泌酶類物質(zhì)溶解周圍基質(zhì)(侵襲)，與血管或淋巴管內(nèi)皮細胞相互作用，進入管內(nèi)運行及種植遠處器官發(fā)生轉(zhuǎn)移。研究報道，由癌到癌旁組織MMP-2，MMP-9表達均存在由陽性逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殛幮缘内厔荩崾灸[瘤細胞可以通過可溶性介質(zhì)或膜結(jié)合分子、與間質(zhì)細胞進行信息交換，協(xié)同產(chǎn)生和調(diào)節(jié)MMP-2，MMP-9，促進肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移。另外在小鼠的試驗中發(fā)現(xiàn)肝素酶通過促進VEGF的表達，激活內(nèi)皮細胞的增生和新生血管的形成，促進肺癌細胞遠處轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)整合素娜能夠與纖維連接蛋白(Fibronectin,FN)和血漿糖蛋白(Vitronectin，VN)相互作用而促使肺癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移。盡管人們對肺癌轉(zhuǎn)移進行了許多研究，但其轉(zhuǎn)移機制仍然不清楚。高通量測序技術(shù)的發(fā)展為研究轉(zhuǎn)移機制提供了新的手段。利用高通量測序技術(shù)比較不同階段腫瘤組織基因表達譜的差異，篩選腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)的基因，可發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移標志物和藥物治療靶標。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種可用于肺鱗癌轉(zhuǎn)移診斷的分子標志物。使用基因標志物來診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的具有及時性、特異性和靈敏性，從而使患者在轉(zhuǎn)移早期就能知曉疾病風險，針對風險高低，采取相應(yīng)的預(yù)防和治療措施。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了檢測TEX13B基因表達的產(chǎn)品在制備診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的工具中的應(yīng)用。

進一步，所述檢測TEX13B基因表達的產(chǎn)品包括檢測TEX13B基因mRNA水平的產(chǎn)品、和/或檢測TEX13B蛋白水平的產(chǎn)品。

進一步，所述檢測TEX13B基因表達的產(chǎn)品包括：通過RT-PCR、實時定量PCR、免疫檢測、原位雜交或芯片檢測TEX13B基因表達以診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品。

進一步，所述用RT-PCR診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品至少包括一對特異擴增TEX13B基因的引物；所述用實時定量PCR診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品至少包括一對特異擴增TEX13B基因的引物；所述用免疫檢測診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品包括：與TEX13B蛋白特異性結(jié)合的抗體；所述用原位雜交診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品包括：與TEX13B基因的核酸序列雜交的探針；所述用芯片診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括與TEX13B蛋白特異性結(jié)合的抗體，基因芯片包括與TEX13B基因的核酸序列雜交的探針。

所述用實時定量PCR診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的產(chǎn)品至少包括的一對特異擴增TEX13B基因的引物如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。

所述檢測TEX13B基因表達的產(chǎn)品可以是檢測TEX13B基因表達的試劑、也可以是包含所述試劑的試劑盒、芯片、試紙等，也可以是使用所述試劑的高通量測序平臺。

所述診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的工具包括但不限于芯片、試劑盒、試紙、或高通量測序平臺；高通量測序平臺是一種特殊的診斷肺鱗癌轉(zhuǎn)移的工具，隨著高通量測序技術(shù)的發(fā)展，對一個人的基因表達譜的構(gòu)建將成為十分便捷的工作。通過對比疾病患者和正常人群的基因表達譜，容易分析出哪個基因的異常與疾病相關(guān)。因此，在高通量測序中獲知TEX13B基因的異常與肺鱗癌轉(zhuǎn)移相關(guān)也屬于TEX13B基因的用途，同樣在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。