[發(fā)明專利]PCDH18基因在制備結(jié)直腸癌診斷試劑盒中的應(yīng)用及試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610300848.5
• 申請日: 2016-05-09
• 公開（公告）號: CN105755153B
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張云;周丹;安漢祥;湯瑋瑋
• 申請（專利權(quán)）人: 廈門稀土材料研究所
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 浙江千克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 冷紅梅

本發(fā)明提供了一種特異性強、靈敏度高的結(jié)直腸癌基因診斷分子標志物——PCDH18基因在制備結(jié)直腸癌診斷試劑盒中的應(yīng)用，以及一種結(jié)直腸癌診斷試劑盒。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種結(jié)直腸癌新的分子標志物，提供了PCDH18基因在制備結(jié)直腸癌診斷試劑盒中的應(yīng)用，以及一種結(jié)直腸癌診斷試劑盒，與傳統(tǒng)的檢測手段相比，分子標志物的診斷更及時、更特異，從而提高結(jié)直腸癌患者的5年生存率，降低死亡率，應(yīng)用前景廣闊。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及PCDH18基因在制備結(jié)直腸癌診斷試劑盒中的應(yīng)用，以及一種結(jié)直腸癌診斷試劑盒。

(二)背景技術(shù)

結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)是最常見的消化道惡性腫瘤之一，在世界范圍內(nèi)，發(fā)病率居于惡性腫瘤第三位，死亡率居第四位，每年約有120萬新發(fā)病例，嚴重威脅人類健康。結(jié)直腸癌在全球范圍內(nèi)具有明顯的地域分布差異，其中亞洲發(fā)病率較高，尤其是中國，主要與年齡、家族史、不健康的飲食及生活習(xí)慣等危險因素有關(guān)。大部分結(jié)直腸癌患者確診時已處于腫瘤進展期，失去了最佳的治療時機，導(dǎo)致五年生存率不到20％，預(yù)后較差。因此，探索結(jié)直腸癌快速診斷的評估方法，提高診療水平，提高存活率，是當(dāng)前研究的熱點和難點。

目前臨床上用于結(jié)直腸癌診斷的方法包括：光學(xué)檢查和形態(tài)學(xué)檢查，常規(guī)的檢查方法主要有排泄物便潛血檢查、排泄物免疫學(xué)檢查、鋇劑雙重造影檢查、彈性乙狀結(jié)腸鏡檢查、結(jié)腸鏡檢查和CT結(jié)腸成像。但是，上述檢測方法仍存在一定局限性，如便潛血檢查分離過程繁瑣，易受細菌、食物及腸道粘液等干擾；結(jié)腸鏡檢查對設(shè)備和檢測人員技術(shù)的要求較高，誤診率較大。

隨著結(jié)直腸癌的發(fā)病機制的研究越來越廣泛，分子生物標記物在其中的重要性越來越明顯。這些標記物已成為結(jié)直腸癌診斷和治療的重要靶點。PCDH18基因定位于4q28.3，屬于原鈣黏蛋白超家族成員之一，原鈣粘附蛋白(protocadherin)是鈣粘蛋白超家族中一個最大的亞族。鈣粘附蛋白家族(cadherin family)為鈣離子依賴型粘附分子，均為單鏈跨膜糖蛋白，介導(dǎo)特定組織或器官同型細胞間粘附，對胚胎發(fā)育中細胞識別、遷移、通訊和組織分化及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)回路的形成具有重要作用。原鈣粘附蛋白在神經(jīng)元發(fā)育和突觸形成中有重要的作用。原鈣粘附蛋白18(protocadherinl 8，PCDH18)基因表達主要在小鼠的前腦、后腦腦室管膜區(qū)、嗅泡、大腦皮層、丘腦、及小腦中。有關(guān)原鈣黏蛋白家族與疾病發(fā)生的關(guān)系是近年來大家關(guān)注的熱點問題。目前已有多個原鈣黏蛋白家族成員被證實在肝癌、宮頸癌、前列腺癌、食管癌等在內(nèi)的人類多種腫瘤中存在差異性表達并通過激活下游信號通路調(diào)控腫瘤發(fā)生發(fā)展。

現(xiàn)有研究表明PCDH18可激活記憶T細胞，但并沒有研究揭示其與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種特異性強、靈敏度高的結(jié)直腸癌基因診斷分子標志物——PCDH18基因在制備結(jié)直腸癌診斷試劑盒中的應(yīng)用，以及一種結(jié)直腸癌診斷試劑盒。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

PCDH18基因在制備結(jié)直腸癌診斷試劑盒中的應(yīng)用。

PCDH18基因包括人PCDH18基因、前體、亞型以及人PCDH18基因的任何功能等同物的多核苷酸。PCDH18基因包括與目前國際公共核酸序列數(shù)據(jù)庫GeneBank中PCDH18基因(NC_000004.12)DNA序列具有70％以上的同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列。

PCDH18基因的編碼序列包括以下任一種DNA分子：

(1)序列表中SEQ ID NO.1所示的DNA序列；

(2)在嚴格條件下與(1)限定的DNA序列雜交且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列；

(3)與(1)或(2)限定的DNA序列具有70％、優(yōu)選地，90％以上同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列。