[發(fā)明專(zhuān)利]一種脂肪酶催化在線合成5’?O?棕櫚酰尿苷的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610287078.5
• 申請(qǐng)日: 2016-04-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105838600B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅錫平;杜理華;成柄灼
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/40
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/40;C12P19/38
• 代理公司: 杭州天正專(zhuān)利事務(wù)所有限公司33201
• 代理人: 黃美娟,俞慧

1.一種脂肪酶催化在線合成5'-O-棕櫚酰尿苷的方法，其特征在于所述方法采用微流控通道反應(yīng)器，所述的微流控通道反應(yīng)器包括注射泵、注射器、反應(yīng)通道和產(chǎn)物收集器，所述注射器安裝于注射泵中，通過(guò)一個(gè)接口與反應(yīng)通道入口連接，所述產(chǎn)物收集器通過(guò)一個(gè)接口與反應(yīng)通道出口連接，所述反應(yīng)通道內(nèi)徑為0.8～2.4mm，反應(yīng)通道長(zhǎng)為0.5～1.0m；所述方法包括：以體積比為1:8～16的二甲亞砜和叔戊醇為反應(yīng)溶劑，以摩爾比為1:5～13的尿苷與棕櫚酸乙烯酯為原料，以0.5～1.0g脂肪酶Lipozyme TLIM為催化劑，將原料和反應(yīng)溶劑置于注射器中，將脂肪酶Lipozyme TLIM均勻填充在反應(yīng)通道中，在注射泵的推動(dòng)下使原料和反應(yīng)溶劑連續(xù)通入反應(yīng)通道器中進(jìn)行酰化反應(yīng)，使反應(yīng)體系中尿苷的濃度為0.03～0.07mmol/mL，控制酰化反應(yīng)溫度為15～50℃，酰化反應(yīng)時(shí)間為20～35min，通過(guò)產(chǎn)物收集器在線收集反應(yīng)液，反應(yīng)液經(jīng)常規(guī)后處理得5'-O-棕櫚酰尿苷。

2.如權(quán)利要求1所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-棕櫚酰尿苷的方法，其特征在于：所述的方法包括下列步驟：先用一定量的DMSO為溶劑溶解尿苷，再加叔戊醇至一定體積，裝于注射器中備用；用叔戊醇溶解棕櫚酸乙烯酯至一定體積，裝于另一注射器中備用；然后在注射泵推動(dòng)下使原料和反應(yīng)溶劑通入反應(yīng)通道中進(jìn)行反應(yīng)。

3.如權(quán)利要求1所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-棕櫚酰尿苷的方法，其特征在于：所述微流控通道反應(yīng)器包括恒溫箱，所述反應(yīng)通道置于恒溫箱中。

4.如權(quán)利要求2所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-棕櫚酰尿苷的方法，其特征在于：所述微流控通道反應(yīng)器包括恒溫箱，所述反應(yīng)通道置于恒溫箱中。

5.如權(quán)利要求1～4之一所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-棕櫚酰尿苷的方法，其特征在于：所述反應(yīng)溶劑中二甲亞砜與叔戊醇的體積比為1:12～16，所述尿苷與棕櫚酸乙烯酯的摩爾比為1:9～11，反應(yīng)體系中尿苷的濃度為0.04～0.06mmol/mL，所述酰化反應(yīng)溫度為20～40℃，所述酰化反應(yīng)時(shí)間為25～35min。

6.如權(quán)利要求1～4之一所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-棕櫚酰尿苷的方法，其特征在于：所述反應(yīng)溶劑中二甲亞砜與叔戊醇的體積比為1:14，所述尿苷與棕櫚酸乙烯酯的摩爾比為1:9，反應(yīng)體系中尿苷的濃度為0.05mmol/mL所述酰化反應(yīng)溫度為30℃，所述酰化反應(yīng)時(shí)間為30min。