[發(fā)明專利]一種銅綠假單胞菌菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610285955.5
• 申請(qǐng)日: 2016-05-03
• 公開（公告）號(hào): CN105754908B
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張春花;成文章;蔣智林;單治國(guó);饒智;王超;楊應(yīng)明;羅華元
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 普洱學(xué)院;紅云紅河煙草（集團(tuán)）有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A62D3/02;C12R1/385;A62D101/04;A62D101/26
• 代理公司: 合肥順超知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 34120
• 代理人: 俞強(qiáng)

本發(fā)明公開了一種銅綠假單胞菌菌株及其應(yīng)用，所述銅綠假單胞菌菌株保藏編號(hào)為：CGMCC No.11776。本發(fā)明是從煙草根部土壤中分離得到的一株高效降解卵菌殺菌劑—代森錳鋅的銅綠假單胞菌，實(shí)驗(yàn)表明該菌能夠在LB培養(yǎng)基中利用代森錳鋅作為唯一碳源和能源而生長(zhǎng)，并使代森錳鋅降解；在添加外源營(yíng)養(yǎng)物的液體培養(yǎng)條件下，該菌48h能夠?qū)⒒烊肱囵B(yǎng)基中5mg/L的高濃度代森錳鋅降解90％以上，并且在較寬的pH范圍內(nèi)均有較好的降解效果；該菌可以用于水體及表面殘留的代森錳鋅的生物降解，彌補(bǔ)了目前利用銅綠假單胞菌降解代森錳鋅農(nóng)藥殘留的技術(shù)空白。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種銅綠假單胞菌菌株及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

化學(xué)農(nóng)藥具有適用范圍廣、防治對(duì)象多、生產(chǎn)成本低、防治效果好以及經(jīng)濟(jì)效益高等優(yōu)點(diǎn)，其廣泛適用極大地促進(jìn)了現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展，提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的勞動(dòng)效率和機(jī)械化程度。但是不可避免地，大量使用農(nóng)藥殺傷昆蟲天敵和有益微生物、使有害生物產(chǎn)生抗性、造成人、畜中毒、易對(duì)植物產(chǎn)生藥害等問題，進(jìn)入環(huán)境中的化學(xué)農(nóng)藥，一部分可通過陽光照射、土壤中微生物等的作用，而逐步降解失效；另一部分最終會(huì)通過“食物鏈”的作用，進(jìn)入人體，對(duì)人造成長(zhǎng)期危害。各類化學(xué)農(nóng)藥目前已廣泛進(jìn)入全球空氣及大氣沉降物、水體、土壤、底泥級(jí)生物體等自然環(huán)境中，成為環(huán)境中無所不在的污染物，因此探索對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行有效降解的方法成為研究人員長(zhǎng)期努力的一個(gè)重要研究方向。而在該領(lǐng)域研究中，近年來廣泛興起的使用微生物對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行生物降解成為熱點(diǎn)領(lǐng)域，通過微生物作用將農(nóng)藥大分子分解成小分子化合物，并使其喪失活性。由于微生物個(gè)體小、繁殖迅速、比表面大等特點(diǎn)。它們較之其它生物更易適應(yīng)環(huán)境，并可通過自然突變產(chǎn)生新菌種，產(chǎn)生新的酶系統(tǒng)，具有新的代謝功能，從而可參與對(duì)人工新合成化合物的降解與轉(zhuǎn)化作用，因此微生物對(duì)降解農(nóng)藥殘留具有巨大潛力。假單胞菌科，專性需氧的革蘭氏染色陰性無芽胞、無莢膜桿菌，呈桿狀或略彎，菌體大小(0.5～1)×(1.5～4)微米，具端鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。有些株產(chǎn)生熒光色素或(和)紅、藍(lán)、黃、綠等水溶性色素，不發(fā)酵糖類。大多數(shù)菌的適溫為30℃。DNA中的G+C克分子含量為58～70％。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種銅綠假單胞菌菌株及其應(yīng)用，旨在解決降解代森錳鋅殘留的問題，提供一種高效降解代森錳鋅的微生物菌種,該菌能高效降解代森錳鋅，可以用于去除煙葉中代森錳鋅殘留的微生物降解技術(shù)。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種銅綠假單胞菌菌株，所述銅綠假單胞菌菌株保藏編號(hào)為：CGMCC No.11776。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述的銅綠假單胞菌菌株的培養(yǎng)方法，所述培養(yǎng)方法包括：將銅綠假單胞菌菌體接種到直徑60毫米平皿培養(yǎng)基上，在30-37℃，平皿培養(yǎng)基上生長(zhǎng)3-5天；

解剖刀刮取菌體，接入液體培養(yǎng)基中，2個(gè)培養(yǎng)皿刮取的菌絲接種到100ml培養(yǎng)液中，于30-37℃，240rmp/min轉(zhuǎn)速條件下振蕩培養(yǎng)3-5天，獲得包含其分泌的胞外降解酶的培養(yǎng)液，為菌絲及菌液的混合菌劑。

進(jìn)一步，所述平皿培養(yǎng)基組成為：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl10g，瓊脂粉15g，蒸餾水1000ml，pH7.5。

進(jìn)一步，所述液體培養(yǎng)基組成為：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl10g，蒸餾水1000ml，pH7.5。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述銅綠假單胞菌菌株在降解代森錳鋅農(nóng)藥殘留的應(yīng)用。

進(jìn)一步，所述應(yīng)用將經(jīng)過培養(yǎng)的銅綠假單胞菌菌株的培養(yǎng)液100ml中，加入濃度5-10mg/L的代森錳鋅農(nóng)藥，于37℃，轉(zhuǎn)速240rmp/min，搖床震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間48小時(shí)以上。