[發(fā)明專利]血清外泌體miR?9?3p和miR?124?3p作為急性腦梗死的診斷標(biāo)志物的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610285932.4
• 申請日: 2016-04-29
• 公開（公告）號: CN105925677B
• 公開（公告）日: 2018-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 季秋虹;季煜華;季菊玲
• 申請（專利權(quán)）人: 南通大學(xué)附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 南京鐘山專利代理有限公司32252
• 代理人: 戴朝榮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種血清外泌體miR-9-3p和miR-124-3p作為急性腦梗死的診斷標(biāo)志物的應(yīng)用。

背景技術(shù)

腦卒中是世界范圍內(nèi)發(fā)病率及死亡率較高的疾病之一，是導(dǎo)致成年人致殘的首要因素。具備“五高”的特點(diǎn)，即高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率、高額診治費(fèi)用，給國家和患者家庭造成沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。缺血性卒中(Ischemic stroke，IS)占全部腦卒中的80％[Donnan GA,Fisher M,Macleod M,et al.Stroke[J].Lancet,2008,371(9624):1612-1623.]，采用組織型纖維蛋白溶酶原活化劑(t-PA)的溶栓治療，以使閉塞的血管再通以挽救缺血半暗帶是目前最為有效的治療手段，但這受限于狹窄的溶栓時間窗，通常急性腦梗死的靜脈溶栓時間在4.5h，這也成為當(dāng)前溶栓治療的瓶頸，因此，早期診斷已成為腦梗死成功治療的關(guān)鍵。核磁共振是目前臨床診斷最為有效的方法，但該方法也存在一些問題，比如影像學(xué)的檢查通常是滯后的，早期急性腦梗死患者的核磁共振檢查無明顯改變，這都會影響到臨床的決策和治療。此外，由于該設(shè)備的費(fèi)用問題影響了其普及性，并且檢查的時間延誤也嚴(yán)重影響著患者治療。因此找尋診斷腦缺血損傷早期診斷的標(biāo)志物是臨床卒中研究的重要課題。已有研究發(fā)現(xiàn)了多種可以用于腦梗死診斷的蛋白標(biāo)志物，如S-100β[Dassan P,Keir G,Brown MM.Criteria for a clinically informative serum biomarker in acute ischaemic stroke:a review of S100β[J].Cerebrovasc Dis,2009,27(3):295-302.]和NSE[Anand N,Stead LG.Neuron-specific enolase as a marker for acute ischemic stroke:a systematic review[J].Cerebrovasc Dis,2005,20(4):213-219.]，但它們并非腦損傷特異性蛋白，一些其他疾病如黑素瘤或組織損傷也會使其表達(dá)增加，因而這些蛋白質(zhì)并不是理想的標(biāo)志物。

MicroRNA是一種內(nèi)源性的22個核苷酸的小分子單鏈RNA，通過靶向mRNA的3`UTR降解mRNA，或抑制其翻譯從而實(shí)現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)節(jié)[Wevers KP,Kruijff S,Speijers MJ,et al.S-100B:a stronger prognostic biomarker than LDH in stage IIIB-C melanoma[J].Ann Surg Oncol,2013,20(8):2772-2779.]。血液中也存在著microRNAs，它們具有較高的穩(wěn)定性和一定的組織特異性，是臨床診斷標(biāo)志物的理想選擇[Bartel DP.MicroRNAs:genomics,biogenesis,mechanism,andfunction[J].Cell,2004,116(2):281-297.]。最近研究發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死患者或腦缺血損傷動物模型血液中的microRNA表達(dá)顯著變化，如腦缺血和動脈粥樣硬化患者血清中l(wèi)et-7e[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]、miR-21[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]和miR-145[Peng G,Yuan Y,Wu S,et al.MicroRNA let-7e Is a Potential Circulating Biomarker of Acute Stage Ischemic Stroke[J].Transl Stroke Res,2015,6(6):437-445.]的水平增高，而mirR-221[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]和miR-210[Tsai PC,Liao YC,Wang YS,et al.Serum microRNA-21 and microRNA-221 as potential biomarkers for cerebrovascular disease[J].J Vasc Res,2013,50(4):346-354.]則顯著降低，因此認(rèn)為它們可以作為腦梗死早期診斷的血液標(biāo)志物。但它們同樣缺乏組織特異性，miR-145是主要分布在血管平滑肌細(xì)胞[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]而miRNA-210則是氧敏感性microRNA[Creemers EE,Tijsen AJ,Pinto YM.Circulating microRNAs:novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease？[J].Circ Res,2012,110(3):483-495.]。