[發明專利]一種高活性松茸多糖的制備方法

在審

• 申請號: 201610285636.4
• 申請日: 2016-05-04
• 公開（公告）號: CN105732839A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 杜秀菊;陳韻
• 申請（專利權）人: 聊城大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于大型真菌有效成分提取領域，具體涉及一種高活性松茸多糖的制備方法。

背景技術

松茸(TricholomamatsutakeSing)，分屬于擔子菌亞門、口蘑科、口蘑屬，亦稱松口蘑。松茸子實體香氣宜人，肉質鮮美，含有多糖、蛋白質、氨基酸、多種維生素（維生素B1、B2、維生素C、維生素PP等）和微量元素等成分，具有很高的食用價值和藥用價值，被譽為“食用菌之王”。

研究表明，松茸多糖是其重要的活性成分，具有明顯的增強機體免疫能力、抑制癌細胞增殖和治療糖尿病等特殊功能，其中，以抗腫瘤活性最為顯著，遠遠高于靈芝。日本的千原吳郎等（1969）實驗結果發現，松茸子實體多糖對小鼠肉癌S-180的抑制率高達91.8%，對艾氏腹水癌的抑制率為70%。

松茸主要生長于海撥1600-3200米的松林或櫟樹林中，是一種典型的外生菌根菌，屬林下產品。目前，松茸的人工栽培仍未獲得成功，子實體的產生純粹依靠自然形成，因此產量很低，一年中僅夏季收獲一次，是一種非常珍貴的稀有野生資源。目前，人們通常將松茸子實體烹飪后直接食用，雖然亦不失為一種美味佳肴，但并不能使其原有功效充分發揮出來。因此，合理開發松茸的野生資源，充分發揮其有效成分的功效，具有非常重要的意義。

松茸中多糖種類復雜，包含多種多糖組分，它們具有不同的分子結構和不同的分子量范圍，試驗表明，多糖的生物活性與分子量的大小和化學結構都有非常密切的關系。目前對于松茸多糖的提取方法大多采用熱水浸提法，往往僅以提取得率作為優化提取工藝的指標，這樣提取的多糖的生物活性未必最高；多糖的制備方法通常采用一步醇沉法，其缺點是把不同分子量與結構不同的多糖都混雜在一起，不能使其有效的活性部位得到富集，因此所表現出的生物活性往往不明顯。

發明內容

本發明提供一種松茸多糖分離純化的工藝，是一種新的提取分離方法，使多糖的活性部位得到有效富集，生物活性得到了很大提高，適用于規模化生產。

本發明的技術方案如下：A.原料的清洗：取1kg松茸子實體，洗凈，60℃烘干至恒重；B.原料的粉碎：將松茸粉碎，80目過篩；C.原料的預處理；D.松茸多糖的溶出，制備松茸多糖TMP；E.松茸多糖的乙醇分級，富集活性部位，利用不同濃度的乙醇依次沉淀，得到系列精制多糖，從而獲得高活性的松茸多糖組分。

前面所述的方法，優選的方案是，步驟A．原料的清洗是指，去1kg松茸子實體，洗凈，60℃烘干至恒重。

前面所述的方法，優選的方案是，步驟B．原料的粉碎是指，將烘干了的松茸子實體粉碎，80目過篩。

前面所述的方法，優選的方案是，步驟C．原料的預處理是指，取松茸粉末，置于8-16倍體積的60-95%乙醇溶液中浸泡18-30h（優選的，置于9-12倍體積的80-95%乙醇溶液中浸泡20-24h，更加優選的，置于10倍體積的95%乙醇溶液中浸泡24h），以除去脂肪、部分單（寡）糖及脂溶性色素，殘渣于陰涼處風干。

前面所述的方法，優選的方案是，步驟D．松茸多糖的溶出是指，預處理后的殘渣風干后，選擇浸提時間為1-3h，提取溫度為70-100℃，水（蒸餾水）料比為10-25mL/g（v/w），80-120目紗布過濾（優選的，選擇時間為1.5-2.5h，溫度為80-95℃，水（蒸餾水）料比為15-18mL/g（v/w），90-110目紗布過濾；更加優選的，選擇時間為2h，溫度為90℃，水（蒸餾水）料比為15mL/g（v/w），100目紗布過濾），濾渣重復提取2次。合并兩次提取液，旋轉蒸發儀濃縮至提取總體積的1/15-1/5（優選的，濃縮至提取總體積的1/10-1/5）。

前面所述的方法，優選的方案是，步驟E.松茸多糖的酒精分級，富集活性部位是指，采用終濃度為15-35%的乙醇沉淀多糖（優選的，采用終濃度為25-30%的乙醇沉淀多糖），收集沉淀并干燥，得到松茸多糖組分1；對剩余上清繼續采用終濃度為50%-70%的乙醇沉淀多糖（優選的，采用終濃度為55-65%的乙醇沉淀多糖），收集沉淀并干燥，得到松茸多糖組分2；對剩余上清繼續采用終濃度為70-90%的乙醇沉淀多糖（優選的，采用終濃度為75-85%的乙醇沉淀多糖），收集沉淀并干燥，得到松茸多糖組分3。

本發明公開了一種高活性松茸多糖的制備方法，與現有技術相比，具有如下優點：本發明的創新性在于：