[發(fā)明專利]一種馬駑巴貝斯蟲病熒光PCR檢測試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610274783.1 | 申請日： | 2016-04-28 |
| 公開（公告）號： | CN105734158A | 公開（公告）日： | 2016-07-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 巴音查汗·蓋力克;張楊;李永暢;王振寶;宋瑞其;明·烏爾娜;王美玲 | 申請（專利權(quán)）人： | 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 烏魯木齊博亞思知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 65110 | 代理人： | 王志剛 |
| 地址： | 830052 新疆維吾爾自*** | 國省代碼： | 新疆;65 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 種馬 駑巴貝斯蟲病 熒光 pcr 檢測 試劑盒 | ||
1.一種用于檢測馬駑巴貝斯蟲病(Babesiacaballi)的遺傳標記物，其具有SEQIDNo.4所示的序列或其特異性片段。
2.用于擴增權(quán)利要求1所述遺傳標記物的特異性引物對，其核苷酸序列為SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示：
上游引物：5’-CGCATTTGCAGTCAGGTCC-3’
下游引物：5’-ACTGGTAGGGCTCAGGAAGG-3’。
3.與權(quán)利要求2所述的引物配合使用的熒光探針，其核苷酸序列為SEQIDNo.3所示：
5’-AGGGGAGTAACTGCAGTGCTTCCGT-3’。
4.一種檢測馬駑巴貝斯蟲病的試劑盒，其特征在于，含有權(quán)利要求2所述的特異性引物對和權(quán)利要求3所述的熒光探針。
5.如權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，還包括熒光定量PCR反應(yīng)試劑，陽性對照品和陰性對照品，所述陽性對照品為馬駑巴貝斯蟲病的標準陽性模板，陰性對照品為滅菌去離子水。
6.如權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，采用熒光PCR方法進行檢測，制定標準陽性模板，其25μL反應(yīng)體系為：
7.根據(jù)權(quán)利要求4-6任一所述的試劑盒，其特征在于，試劑盒中的引物、探針熒光PCR工作程序為：95℃預(yù)變性5min，1個循環(huán)；95℃變性15s，60℃變性45s，40次循環(huán)。
8.如權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，其采用熒光定量PCR方法進行檢測，優(yōu)化后的熒光定量PCR反應(yīng)體系為25μL：
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的特異性引物對和權(quán)利要求3所述的熒光探針在制備檢測馬駑巴貝斯蟲病試劑盒中的應(yīng)用。
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