[發明專利]用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯及其應用

有效

• 申請號: 201610271412.8
• 申請日: 2016-04-28
• 公開（公告）號: CN105906732B
• 公開（公告）日: 2018-02-06
• 發明（設計）人: 王俊龍;包愛娟;牛盛蕃;李清瑤;劉秀蓉;孔維寶;梁俊玉;姚健;張繼
• 申請（專利權）人: 西北師范大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/737;A61P35/00
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司62002
• 代理人: 馬正良

1.一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，包括以下工藝步驟：

a. 多糖溶液的制備：將沙蒿多糖加入到無水甲酰胺中，70~80℃下，轉速為800~1500 rpm，攪拌8~12小時，得到沙蒿多糖的甲酰胺溶液，待用；

b. 沙蒿多糖硅醚衍生物的制備：稱取一定量的咪唑，加入到步驟a中的沙蒿多糖的甲酰胺溶液中，在500~1000 轉/小時轉速攪拌下，70~80℃活化12~24 小時，之后量取一定量的叔丁基二苯基氯硅烷，用恒壓滴液漏斗以0.1~0.5 mL/min的速度滴入咪唑與沙蒿多糖的甲酰胺混合溶液中，在70~90℃下攪拌反應36~48 小時，完畢后室溫下加入1-2倍反應液體積的無水乙醇洗滌5~8 遍，直至濾液遇水不產生乳濁液沉淀為止，用0.45 μm纖維素濾膜在0.06~0.08 MPa下減壓抽濾，濾餅在0.06~0.08 MPa、50~60℃下減壓干燥8~12 小時，得沙蒿多糖硅醚衍生物；

c. 酯化試劑的制備：在-5~5℃下，將氯磺酸用恒壓滴液漏斗以0.2～0.6 mL/分鐘的速度滴加到吡啶中，滴加完畢后，在800~1500 rpm下攪拌反應20～30分鐘，得到酯化試劑；

d. 硫酸化反應：將步驟b得到的沙蒿多糖硅醚衍生物加入無水甲酰胺中分散，得沙蒿多糖硅醚衍生物懸濁液，加入步驟c得到的酯化試劑，于50~60℃反應60~90分鐘，反應完畢后裝入截留 分子量為8000~12000道爾頓的透析袋中，依次于流水中透析24~48小時、去離子水透析12~24小時，每2～5小時換水一次，透析袋內液體在50~60℃、0.06~0.08 MPa下減壓濃縮至原體積的1/30~1/40呈濃縮液，再在濃縮液中加入無水乙醇進行沉淀，其中，乙醇的含量占總體積的70~85%，在0.06~0.08 MPa下減壓抽濾，濾餅在0.06~0.08 MPa、50~60℃下減壓干燥8~12 小時，得硫酸化衍生物；

e. 保護基的除去：取步驟d一定量的硫酸化衍生物，加入四氫呋喃攪拌15~30分鐘后加入四丁基氟化銨，室溫下500~1000 rpm攪拌反應48~60小時，完畢后在0.06~0.08 MPa下減壓抽濾，濾餅用20~50 mL無水乙醇洗滌4~5次，之后濾餅在-60~-50℃、1~10 Pa的條件下冷凍干燥24~48小時，得區域選擇性合成的沙蒿多糖硫酸酯。

2.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟a中，沙蒿多糖與無水甲酰胺的重量體積比為2~4 mg/mL。

3.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟b中，咪唑與沙蒿多糖的重量比2:1~3:1。

4.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟b中，沙蒿多糖與叔丁基二苯基氯硅烷的重量體積比為0.08~0.125 g/mL。

5.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟c中氯磺酸與吡啶的體積比為2:1~1:1。

6.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟d中，沙蒿多糖硅醚衍生物與無水甲酰胺的重量體積比為3~5 mg/mL。

7.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟d中，沙蒿多糖硅醚衍生物懸濁液與酯化試劑的重量體積比為15~20 mg/mL。

8.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟e中，硫酸化衍生物與四氫呋喃的重量體積比為1~2 mg/mL。

9.如權利要求1所述一種用有機硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，其特征在于：步驟e中，四丁基氟化銨與硫酸化衍生物的質量比為7:1~11:1。

10.如權利要求1中所述一種用有機硅烷合成的沙蒿多糖硫酸酯，作為Hela宮頸癌細胞的抑制劑應用于制備抗癌藥物中。