[發明專利]一種金絲李的組培快繁方法

在審

• 申請號: 201610268414.1
• 申請日: 2016-04-27
• 公開（公告）號: CN105684913A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 覃偉
• 申請（專利權）人: 覃偉
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 但玉梅

1.一種金絲李的組培快繁方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)外植體的消毒：采摘6-7月份的金絲李葉，使用20-40％樂果乳劑稀釋400-600倍液 浸泡5-10min，取出后放入超凈工作臺使用4％維生素C水溶液浸泡30min后再3％的次氯酸 進行消毒5-10min，然后用無菌水沖洗3-5次，最后使用滅菌濾紙吸干金絲李葉表面的無菌水；

(2)愈傷組織培養：使用解剖刀沿著金絲李葉的莖干位置橫切出長15-18cm，寬10-15cm 的葉條片，將葉條片放入已經裝入愈傷組織培養基的培養皿中，輕壓葉條片，在29-31℃下暗 培養8-15天，而后轉入26-28℃下進行8-15天的暗培養，獲得金絲李愈傷組織；

(3)愈傷組織分化芽：將上述得到的愈傷組織移置芽誘導培養基中，其中，芽誘導培養 基的配方為MS+6-8g/L瓊脂+25-29g/L蔗糖+0.3-0.8mg/L6-芐基嘌呤+0.8-1.5mg/L萘乙酸， 調節培養基的pH值為6.0-7.5，于25-28℃條件下，光暗培養30-45天后愈傷組織分化出芽；

(4)芽生根：待步驟(3)中芽長至5-6cm時，將芽移置根誘導培養基中，其中，根誘 導培養基的配方為MS+6-8g/L瓊脂+25-29g/L蔗糖+0.8-2.5mg/L吲哚乙酸+0.5-1.5mg/L激動素 +0.8-1.5mg/L活性炭+0.1-0.5mg/L瑞毒霜+0.5-1.5mg/L復硝酚鈉+0.3-0.8mg/L維生素 D2+0.15-0.35mg/L微囊藻素，于25-28℃條件下，光暗培養20-30天，培養出幼苗，組培結束。

2.根據權利要求1所述的金絲李的組培快繁方法，其特征在于，所述每個培養皿放入 3-5片的葉條片。

3.根據權利要求1所述的金絲李的組培快繁方法，其特征在于，所述愈傷組織培養基的 配方為MS+6-8g/L瓊脂+25-29g/L蔗糖+0.3-0.8mg/L6-芐基嘌呤+0.8-1.5mg/L萘乙酸，調節 培養基的pH值為6.5-7.0；將培養基放入高溫滅菌鍋，在121-130℃、1.1-1.5kg/cm²條件下進 行滅菌30-50min，然后取出冷卻至45℃后迅速在超凈工作臺中傾倒分裝到已經經過高溫滅菌 鍋滅菌的培養皿中。

4.根據權利要求1所述的金絲李的組培快繁方法，其特征在于，所述培養皿的規格為 90×15mm；所述裝入培養皿中的培養基為培養皿體積的1/3-1/2。

5.根據權利要求1所述的金絲李的組培快繁方法，其特征在于，所述步驟(3)和步驟 (4)中的光暗培養周期為光培養12h，暗培養4h。

6.根據權利要求1所述的金絲李的組培快繁方法，其特征在于，所述光培養的光照強度 為1500-1700勒克斯。

7.根據權利要求1所述的金絲李的組培快繁方法，其特征在于，所述金絲李葉為顏色嫩 綠、完整、無病蟲害；金絲李葉的采摘時間為晚上1-2點。