[發(fā)明專利]一種野菊花中的總黃酮的測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610268358.1
• 申請日: 2016-04-27
• 公開（公告）號: CN105758980A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳學(xué)松;王麗麗;韋濤;梁美艷;黃新惠
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號: G01N30/74
• 分類號: G01N30/74;G01N30/08
• 代理公司: 廣州市越秀區(qū)海心聯(lián)合專利代理事務(wù)所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為;蔡國

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及實(shí)驗(yàn)室檢測領(lǐng)域，特別是一種野菊花中的總黃酮的測定方法。

背景技術(shù)

時(shí)珍國醫(yī)國藥2007年第18卷第5期公開了一種通過超聲波提取野菊花中的總黃酮的方法，該方法采用超聲萃取法對野菊花中的總黃酮進(jìn)行萃取，萃取溶劑為95％的乙醇溶液，然后進(jìn)行分光光度法進(jìn)行檢測。

隨著快速檢測技術(shù)的發(fā)展，通過超聲萃取法、快速溶劑萃取法可以得到中藥中的多種有效成分，難點(diǎn)在于，如何有效調(diào)整各參數(shù)達(dá)到對各組分準(zhǔn)確測試的目的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種野菊花中的總黃酮的測定方法，該方法相比于超聲萃取法萃取并進(jìn)行分光光度法檢測得到結(jié)果更加精確。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種野菊花中的總黃酮的測定方法，包括以下步驟：

步驟1：將野菊花粉碎后過篩，取0.25重量份的野菊花粉與0.3g硅藻土混合，加入到預(yù)先鋪設(shè)有濾膜的萃取池中進(jìn)行靜態(tài)萃取獲得萃取液，萃取條件為：萃取溶劑為重量比為1:9的乙酸和乙醇的混合物，萃取溫度110℃，靜態(tài)萃取時(shí)間為3min，沖洗體積70％，靜態(tài)循環(huán)次數(shù)為3次，萃取壓力1500psi；

步驟2：將萃取液稀釋離心后，得到上清液；

步驟3：將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析；

其中，液相色譜法的分析條件為：

a)儀器：液相色譜儀

b)色譜柱C₁₈3μm3×100mm

c)柱溫：40℃

d)流速：0.5mL/min

e)流動相：乙醇-2wt％醋酸溶液，體積比為25:75

f)檢測波長：322nm。

在上述的野菊花中的總黃酮的測定方法中，所述的萃取池的體積為5ml，所述的靜態(tài)萃取的吹掃時(shí)間為60s。

在上述的野菊花中的總黃酮的測定方法中，步驟2具體為：將萃取液用乙酸和乙醇的混合溶液稀釋后在15000r/min下離心5min，取上清液，步驟2中的乙酸和乙醇混合溶液中乙酸和乙醇的重量比為1:9。

在上述的野菊花中的總黃酮的測定方法中，液相色譜分析所用的儀器為：ThermoU-3000雙三元液相色譜儀，色譜柱為ThermoSyncronisC18色譜柱。

在上述的野菊花中的總黃酮的測定方法中，所述的步驟1中萃取所用到的儀器為ASE350快速溶劑萃取儀。

本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：

本發(fā)明通過ASE靜態(tài)快速溶液萃取方法對野菊花中的總黃酮進(jìn)行萃取，并調(diào)整液相色譜法參數(shù)，達(dá)到對野菊花中的總黃酮更加快速簡便且高精度的測定野菊花中總黃酮的目的。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施方式，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制。

實(shí)施例1：

將野菊花經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過三號篩，約0.25g，精密稱定，與0.5g硅藻土混合均勻，待用，移入到預(yù)先放好過濾膜的5ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后，把萃取液轉(zhuǎn)移于25ml容量瓶中，用重量比為1:9的乙酸和乙醇的混合溶液稀釋至刻度，在15000r/min下離心5min，取上清液，進(jìn)入LC測定。

萃取條件(見表1)為：

表1

分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：

a)儀器：Thermo雙三元液相(U-3000)

b)色譜柱ThermoSyncronisC183μm3×100mm，即碳18色譜柱，直徑3mm，長度100mm，粒徑3μm)

c)柱溫：40℃

d)流速：0.5mL/min

e)流動相：乙醇-2wt％醋酸溶液，20℃條件下體積比為25:75

f)檢測波長：322nm

取3個(gè)批號的野菊花進(jìn)行測試，批號分別為1510020、151001、20150701，采用實(shí)施例1的萃取和檢測方法進(jìn)行測試，同時(shí)對相同批號的產(chǎn)品按照背景技術(shù)記載的超聲萃取和紫外分光光度法測試。測試結(jié)果如下表2：

表2

以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。