[發明專利]一種基于比例法的差次移液校準移液器的方法

在審

• 申請號: 201610268225.4
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN107303515A
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發明（設計）人: 張亞鯤;陳建榮;黃思瑩
• 申請（專利權）人: 浙江師范大學
• 主分類號: B01L3/02
• 分類號: B01L3/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本專利適用于在沒有標準移液器參照的情況下對移液器進行校準

背景技術：

移液器是一種廣泛應用于各種生化試驗，制藥、化工行業中的快速精確地移取少量藥品的儀器，移液器的精確度直接影響到實驗結果的準確性及可靠性。目前，國內外實驗室主要使用的方法為重量分析法。專業的校準單位則主要是用的是對比法根據待測移液器與標準移液器多次加液相互對照對所取樣品的量做比較的方法進行移液器的校準。熒光碳量子點作為一種新型的納米材料具有綠色無污染、易于制備，便于儲存且熒光強度穩定等優點。本發明在二者的基礎上公布了一種不需要使用標準量具對照，依靠移液器通過多次加液即可高精度的校準移液槍的方法，成本低廉，綠色環保，安全可靠，可廣泛適用于各種級別實驗室。

發明內容

本發明創造性在于提出一種實驗條件要求低，精確度高，操作簡便的微量移液器校正方法，優點在于不需要使用標準移液器就可以對已知移液器進行校正且對溶液配置的精度要求較低。

本方法的實施的原理為同一移液器在同一示數下使用同一溶液進行兩組梯度濃度稀釋，利用對兩組溶液稀釋的過程中使用移液器的次數不同，對二者的稀釋后濃度進行濃度通過化學儀器進行量化進行比較得到一個比值，這個比值與其理論濃度之間的比值即為誤差。

由于兩組平行稀釋液的稀釋過程不同，對移液器的使用次數存在差距，因而其測定示數與理論計算比例并不相等，這時候二者之差除以理論值之比即為相對誤差值。

在校正之前，首先對試驗中用到的所有的與實驗相關器材進行足夠的清洗，以減少由實驗條件不潔凈導致誤差，同時必須注意所用的各種量器的精度，且實驗環境溫度差異±1攝氏度。

母液的配置，母液容易保存，在多濃度測定時可根據需要將母液稀釋成不同濃度的溶液以供使用。

溶液線性的驗證與理論零點的計算：待預熱儀器后，待系統穩定后，經驗證標準曲線的線性大于99.9％方可進入校準過程，并求出理論零點位置。

待測溶液的配置，將母液稀釋到合適的濃度以供校準使用，應確保該溶液在經過兩種不同梯度的稀釋后濃度均滿足儀器測定濃度范圍。

儀器線性的驗證：根據實驗儀器操作規范進行儀器線性的驗證，。

梯度濃度的滴定：將移液器示數調節至待測示數，對實驗所需要的容量瓶進行標號，對待測溶液進行兩組不同濃度梯度的稀釋，且兩組稀釋溶液的最終計算濃度之比應該盡可能 的接近0.5≤n≤2，以增加實驗精確度，由于實驗室常用容量瓶種類繁多，因此可用于各種不同量的溶液進行不同種類的梯度濃度稀釋并使二者達到一個相近的濃度。

數據的測定，按照儀器使用說明書及注意事項進行操作，測得兩次濃度稀釋最終的示數。

數據計算，根據實驗所得數據，進行通過計算得出移液器在該示數下的誤差。

計算公式ω＝n(B-Z)*β1*β2/[(A-Z)*α1]-1

式中：ω：相對誤差 Z：理論零點 A：進行一次稀釋的溶液測定示數

B：進行兩次稀釋的溶液的測定示數n：兩溶液理論濃度比c(A)/c(B)

下表為0-5ml中幾個典型校準點所用的容量瓶大小及濃度校正系數

表1

附圖說明：

如圖1所示為本操作方法流程圖

具體實施方法：

在此以1ml單位容量使用NaCl溶液配合原子吸收分光光度計為例對該量度下的移液器進行校準對本發明進行說明。

當示數為1的時候，首先根據量度對移液用容量瓶及稀釋用溶液進行選擇因而我們可以選擇兩個10ml容量瓶和一個100ml容量瓶進行多次稀釋對100ml容量瓶標記為A1，對兩個10ml容量瓶分別標記為B1、B2。并對兩個容量瓶使用重量法校正容量瓶的誤差系數，A1為α1，B1校正系數為β1、β2，其中誤差系數＝理論容量/實際容量。

使用母液用配制校準微量移液器所需的NaCl原液，確保其稀釋一百倍后濃度在ppb-ppb之間。

原子發射光譜儀線性的驗證，使用梯度濃度的NaCl溶液對原子發射光譜儀的線性進行驗證，待儀器穩定后，線性達到99.9％及以上時開始進行實驗，在驗證線性的過程中，由同 一移液器使用同一計量配置標準溶液，標準溶液的配置濃度差通過滴價次數的不同來確定，以減少誤差。并計算出該線性范圍的理論零點Z數值。