[發(fā)明專利]一種木荷速生耐寒新品種的繁育方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610265515.3
• 申請日: 2016-04-26
• 公開（公告）號: CN105918120B
• 公開（公告）日: 2018-03-13
• 發(fā)明（設計）人: 李波;鄭國強;蔣澤平
• 申請（專利權）人: 江蘇碧云天農林科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京源古知識產權代理事務所(普通合伙)32300
• 代理人: 吳麗娜

1.一種木荷速生耐寒新品種的繁育方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、母株培育：選擇優(yōu)良、健壯、無病蟲害、生長速度快的多年生南部木荷種源作為原原種，3-4月，從原原種取當年生不超過20cm的枝條，將枝條剪成3-5cm的小段，每個小段保留全部葉片，在生根劑中浸蘸2-5s后，插入扦插基質中作為母株；

S2、預處理與外植體采集：母株扦插后按常規(guī)管理4-5個月，在7-9月份，當母株當年生枝條長20-30cm且新萌發(fā)的頂芽長度為10-30mm時，采集母株新萌發(fā)的長度為10-20mm頂芽或側芽作為外植體；

S3、叢芽誘導培養(yǎng)：將外植體消毒后，接種于誘導培養(yǎng)基中；誘導培養(yǎng)基成分為：MS改良培養(yǎng)基+6-BA 1.0mg/L+TDZ 0.03mg/L+瓊脂5g/L+蔗糖30g/L；

誘導培養(yǎng)條件：溫度30±1℃，全光霧條件，培養(yǎng)周期4-5周；

S4、馴化培養(yǎng)：當新芽抽出長度大于20mm時，去頂留8-10mm，以2-4芽/團進行方向性切割后，將芽團暴露于干燥環(huán)境10-20min后浸蘸生根劑，接種于馴化培養(yǎng)基中；其中，馴化培養(yǎng)基成分為：MS改良培養(yǎng)基+6-BA 2.0mg/L+TDZ 0.03mg/L+瓊脂5g/L+蔗糖30g/L+PVP1000mg/L+薄荷油1g/L；

馴化培養(yǎng)條件：第一代溫度25±1℃，后每代遞減5℃，全光霧條件培養(yǎng)5-6代；

S5、馴化鞏固培養(yǎng)：將最后一代馴化培養(yǎng)的叢芽去頂留8-10mm后，以2-4芽/團進行方向性切割后，接種于鞏固培養(yǎng)基中；其中鞏固培養(yǎng)基成分為：MS改良培養(yǎng)基+6-BA1.0mg/L+TDZ 0.02mg/L+瓊脂5g/L+蔗糖30g/L+PVP1000mg/L；

鞏固培養(yǎng)條件：溫度0±1℃，全光霧條件培養(yǎng)4-5代；

S6、繼代擴繁培養(yǎng)：鞏固培養(yǎng)最后一代培養(yǎng)4-6周后待每個芽團有20-30個芽時，對芽粗度大于2mm的粗芽按2-4芽/團進行切割，并采用對剖方式破壞生長點；對芽粗度小于2mm的細小芽以8-10mm的團塊直徑進行切割，將切割好的芽團接種于擴繁培養(yǎng)基中，其中擴繁培養(yǎng)基的成分為：MS改良培養(yǎng)基+6-BA1.0mg/L+TDZ 0.02mg/L+瓊脂5g/L+蔗糖30g/L+PVP1000mg/L；

擴繁培養(yǎng)條件：溫度25±1℃，全光霧條件培養(yǎng)5-6周；

S7、壯苗生根培養(yǎng)：將經(jīng)擴繁培養(yǎng)后的芽團按2-4芽/團進行方向性切割后接種于壯苗生根培養(yǎng)基中，其中壯苗生根培養(yǎng)基的成分為：1/2MS改良培養(yǎng)基+6-BA2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+瓊脂5g/L+蔗糖40g/L；

壯苗生根培養(yǎng)條件：溫度15±1℃，光照時間12±2d，光強25-31.25μmol·m-2·s-1，濕度40-70％；培養(yǎng)時間15-16周。

2.如權利要求1所述的一種木荷速生耐寒新品種的繁育方法，其特征在于：步驟S1中扦插基質為40％紅壤土+40％松葉土+20％木屑，其中紅壤土的粘粒度在30％以下。

3.如權利要求1所述的一種木荷速生耐寒新品種的繁育方法，其特征在于：步驟S1中生根劑成分為：活性炭100-200mg/L+IBA2mg/L+6-BA0.5mg/L。

4.如權利要求1所述的一種木荷速生耐寒新品種的繁育方法，其特征在于：步驟S3中外植體消毒方法為先用無菌水沖洗2min后，于超凈工作臺上用70％的酒精消毒30s后，無菌水沖洗3次后，采用0.5％的升汞和0.2％的吐溫的混合消毒劑浸泡消毒5-15min，再用無菌水沖洗5次。