[發明專利]一種胰島素的酶免疫測定方法

有效

• 申請號: 201610263735.2
• 申請日: 2016-04-26
• 公開（公告）號: CN105954526B
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 曹朝暉;胡小波
• 申請（專利權）人: 南華大學
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所(普通合伙)43205
• 代理人: 許伯嚴

技術領域

本發明涉及酶免疫測定技術領域，尤其涉及一種胰島素的酶免疫測定方法。

背景技術

胰島素對物質代謝的作用非常重要，總的效果是促進合成代謝，抑制分解代謝。若缺少胰島素，則血糖升高。因此，測定血液中胰島素濃度和血糖值對診斷、治療糖尿病是很重要的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種胰島素的酶免疫測定方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種胰島素的酶免疫測定方法，其特征在于：包括胰島素溶液、與胰島素溶液反應的葡萄糖溶液、純碘溶液、氫氧化鈉溶液、鹽酸溶液、酸式滴定管和盛放混合液的容量瓶。

優選的，該胰島素的酶免疫測定方法包括以下步驟：

S1：選取純度較高的一定量的胰島素溶液、過量的葡萄糖溶液靜置備用，

S2：按容量百分比配備葡萄糖溶液并分別放入容量瓶內：0.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份；1摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、1.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份和3摩爾濃度葡萄糖溶液：1份；

S3：將靜置備好的胰島素溶液分成等量6份，然后分別加入到0.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、1摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、1.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份和3摩爾濃度葡萄糖溶液：1份中，用酸式滴定管取適量鹽酸溶液6份，分別放入上述6組混合溶液緩緩攪拌15min，將6組混合放入到水浴鍋中煮沸8min，冷卻后，混合溶液均勻搖晃100-150次重復三次C6H12O6+I2+3NaOH＝C5H11O5COONa+2NaI+2H2O②，2I+2NaOH＝NaIO+NaI+H2O③，NaIO+NaI+2HCl＝I2+2NaCl+H2O④；

S4：根據步驟S3中的反應式④鹽酸溶液(HCl)的消耗分別得出6組混合液中碘溶液(I₂)的剩余量進而得出碘溶液(I₂)的消耗量，由反應式②碘溶液(I₂)的消耗量得到反應式①中葡萄糖的剩余量；

S5：根據步驟S4中，由加入總的葡萄糖量減去由反應式②得出葡萄糖剩余量得到胰島素消耗葡萄糖量，由胰島素消耗葡萄糖量，由反應式①得出RNH₂的含量，進而計算出①胰島素含量。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明提供的一種胰島素的酶免疫測定方法，該胰島素的酶免疫測定方法簡單，制作成本低，便于推廣使用；根據葡萄糖消耗含量，葡萄糖與胰島素的氨的衍生物之間化學反應，能簡便有效地對血液中胰島素的濃度進行計算。

附圖說明

圖1為本發明流程示意圖。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

請參閱圖1，本發明提供一種技術方案：一種胰島素的酶免疫測定方法，其特征在于：包括胰島素溶液、與胰島素溶液反應的葡萄糖溶液、純碘溶液、氫氧化鈉溶液、鹽酸溶液、酸式滴定管和盛放混合液的容量瓶。

該胰島素的酶免疫測定方法包括以下步驟：

S1：選取純度較高的一定量的胰島素溶液、過量的葡萄糖溶液靜置備用，

S2：按容量百分比配備葡萄糖溶液并分別放入容量瓶內：0.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份；1摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、1.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份和3摩爾濃度葡萄糖溶液：1份；

S3：將靜置備好的胰島素溶液分成等量6份，然后分別加入到0.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、1摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、1.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2摩爾濃度葡萄糖溶液：1份、2.5摩爾濃度葡萄糖溶液：1份和3摩爾濃度葡萄糖溶液：1份中，用酸式滴定管取適量鹽酸溶液6份，分別放入上述6組混合溶液緩緩攪拌15min，將6組混合放入到水浴鍋中煮沸8min，冷卻后，混合溶液均勻搖晃100-150次重復三次C6H12O6+I2+3NaOH＝C5H11O5COONa+2NaI+2H2O②，2I+2NaOH＝NaIO+NaI+H2O③，NaIO+NaI+2HCl＝I2+2NaCl+H2O④；