[發明專利]一種基于免疫磁球的淋巴結轉移癌診斷方法及試劑盒

在審

• 申請號: 201610261306.1
• 申請日: 2016-04-25
• 公開（公告）號: CN105779393A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 秦銀輝;龐代文;張志凌;吳玲玲;夏和順;漆楚波
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12Q1/02
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 常海濤

1.一種基于免疫磁球的淋巴結轉移癌細胞的收集方法，其特征在于包括如下步驟：將免 疫磁球加入到轉移癌病人的淋巴結穿刺物中，20～37℃孵育5～10min，磁分選并用1×PBS洗 滌獲得癌細胞；

所述的免疫磁球為修飾了抗上皮粘附分子抗體的磁性納米球；

所述的磁性納米球為表面組裝了5層磁性納米粒子的苯乙烯-丙烯酰胺共聚納米球，其粒 徑為429nm。

2.一種基于免疫磁球的淋巴結轉移癌的診斷方法，其特征在于包括如下步驟：將免疫磁 球加入到含有轉移癌病人淋巴結穿刺物的1×PBS溶液中，20～37℃孵育5～10min，磁分選并 用1×PBS洗滌2次，然后將濁液分散于10μL1×PBS中，用移液槍滴加到粘附載玻片上疏水 筆劃定的區域內，并均勻鋪展開來，將細胞涂片置于鎢燈下進行干片處理，然后用瑞氏染色 試劑對細胞涂片進行染色并在顯微鏡下觀察做出診斷。

3.一種收集淋巴結轉移癌細胞的試劑盒，其特征在于：包含免疫磁球、PBS和磁力架。

4.權利要求3所述的試劑盒的使用方法，其特征在于包括如下步驟：將轉移癌病人的淋 巴結穿刺物分散于1×PBS中，加入免疫磁球20～37℃孵育5～10min，然后用磁力架進行磁分 選并用1×PBS緩沖溶液洗滌，獲得癌細胞。

5.一種淋巴結轉移癌的診斷試劑盒，其特征在于：包含免疫磁球、PBS、磁力架、粘 附載玻片、瑞氏染色試劑。

6.權利要求5所述的試劑盒的使用方法，其特征在于包括如下步驟：將轉移癌病人的淋 巴結穿刺物分散于1mL1×PBS中，加入免疫磁球20～37℃孵育5～10min，然后用磁力架進行 磁分選并用1×PBS洗滌，最后分散于10μL1×PBS中，用移液槍滴加到載玻片疏水筆劃定的 區域內，并均勻鋪展開來，將細胞涂片置于鎢燈下進行干片處理，然后用瑞氏染色試劑對細 胞涂片進行染色并在顯微鏡下觀察。