[發(fā)明專利]雙波長高效液相色譜檢測血栓通的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610259516.7
• 申請日: 2016-04-25
• 公開（公告）號: CN105699563A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發(fā)明（設計）人: 陳學松;林冬杰;李亞;梁慧敏;李澄
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/74
• 分類號: G01N30/74;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區(qū)海心聯(lián)合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為;蔡國

技術(shù)領域

本發(fā)明提供一種測定血栓通的方法，具體地說，是一種雙波長 高效液相色譜檢測血栓通的方法；屬于化學檢測技術(shù)領域。

背景技術(shù)

注射用血栓通(凍干)是用三七總皂苷，加注射用水，灌裝，冷 凍干燥，制成的制劑，收載于國家藥品監(jiān)督管理局標準(試行) WS-10460(ZD-0460)-2002。因為世界衛(wèi)生組織(WHO)、美國食品與 藥物管理局(FDA)以及中國食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)等機構(gòu)已經(jīng) 把HPLC指紋圖譜作為一種可靠的質(zhì)量控制方法。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種采用雙波長檢測，梯 度洗脫，色譜峰分離度好的檢測血栓通的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：

一種雙波長高效液相色譜檢測血栓通的方法，依次包括下述步 驟：

1)精密稱取注射用血栓通0.5g，置l0mL量瓶中，并加水稀釋 至刻度，0.22μm微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；

2)取供試品溶液2μl注入液相色譜儀，流動相流速為 0.8mL/min，采用梯度洗脫，檢測波長為：267nm，287nm；檢測 器：PAD、柱溫為35℃；

所述流動相由A相和B相組成，A相為甲醇-水；B相為乙腈- 水-0.5％磷酸水溶液；所述的A相中甲醇與水體積比10:90，B相中 乙腈、水、0.5％磷酸水溶液的體積比為5：92：3；

所述的梯度洗脫參數(shù)如下：

0-3min；A相與B相的體積比為10:90；

3-5min；A相與B相的體積比為15:85；

5-5.5min；A相與B相的體積比為30:70；

5.5-6.1min；A相與B相的體積比為50:50；

6.1-9min；A相與B相的體積比為20:80；

9-9.1min；A相與B相的體積比為20:80；

進一步的，上述的雙波長高效液相色譜檢測血栓通的方法，所 述的血栓通為凍干粉。

進一步的，上述的雙波長高效液相色譜檢測血栓通的方法，所 述的高效液相色譜儀為ThermoU3000高效液相色譜儀。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案采用雙波長檢測，梯 度洗脫，使得色譜峰分離度好，本方法可操作性強，準確性、重現(xiàn) 性均好，可用于注射用血栓通(凍干)的質(zhì)量控制。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式，對本發(fā)明的權(quán)利要求做進一步的詳細 說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護 范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護范圍之內(nèi)。

本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質(zhì)為液體 的均為體積濃度，溶質(zhì)為固體的均為質(zhì)量濃度。

實施例1

一種雙波長高效液相色譜檢測血栓通的方法，所述的血栓通為 凍干粉，依次包括下述步驟：

1)精密稱取注射用血栓通0.5g，置l0mL量瓶中，并加水稀釋 至刻度，0.22μm微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；

2)取供試品溶液2μl注入液相色譜儀，ThermoU3000高效液 相色譜儀，流動相流速為0.8mL/min，采用梯度洗脫，檢測波長 為：267nm，287nm；檢測器：PAD、柱溫為35℃；

所述流動相由A相和B相組成，A相為甲醇-水；B相為乙腈- 水-0.5％磷酸水溶液；所述的A相中甲醇與水體積比10:90，B相中 乙腈、水、0.5％磷酸水溶液的體積比為5：92：3；

所述的梯度洗脫參數(shù)如下：

0-3min；A相與B相的體積比為10:90；

3-5min；A相與B相的體積比為15:85；

5-5.5min；A相與B相的體積比為30:70；

5.5-6.1min；A相與B相的體積比為50:50；

6.1-9min；A相與B相的體積比為20:80；

9-9.1min；A相與B相的體積比為20:80；