[發明專利]一種金剛烷胺分子印跡膜電化學傳感器的制備方法

在審

• 申請號: 201610258006.8
• 申請日: 2016-04-21
• 公開（公告）號: CN105738443A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 潘明飛;云雅光;劉冰;王碩
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30;G01N27/48
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 李明卓

技術領域

本發明屬于分子檢測技術領域，具體涉及一種金剛烷胺分子印跡膜電化學傳感器的制備方法。

背景技術

金剛烷胺分子具有穩定的三環胺結構，在藥理學上是一種谷氨酰胺受體拮抗劑，用于治療流行性感冒和帕金森綜合征。這種化合物可以通過阻斷病毒復制周期中M2蛋白質子通道的活性來抑制病毒復制。近年來，隨著世界范圍內流感的爆發，養殖業對于金剛烷胺的依賴性增加，使得金剛烷胺的用量和使用范圍被無序擴大，導致了一系列的負作用。比如抗藥性，神經過敏，焦慮，夢魘，間歇性的幻覺。由于它對人類的潛在危害，從2005年開始，包括美國和中國在內的很多國家已經禁止將金剛烷胺用于家禽飼養中的抗流感藥物。然而，這種抗病毒藥物仍然被非法用于家禽飼養中的禽流感的治療，特別是在中國的養雞業中。因此，為了減少其對人類的潛在危害，建立一種簡單，廉價，高靈敏性的方法來檢測動物源性食品中金剛烷胺的殘留是非常必要的。

現在，在動物源性食品中檢測金剛烷胺的方法主要是儀器分析法和免疫分析法。儀器分析法的優點是準確度高，精確性好，但常常需要昂貴和復雜的儀器，樣品預處理費時。基于酶和抗原抗體反應的分析方法具有高特異性和選擇性的優點，但是由于酶和抗體的不穩定性，所以對檢測環境的要求很高。本研究中，我們建議有效的結合儀器分析法和生物分析法的優點來建立一種簡單，快速，特異性，廉價，現場分析，準確而且靈敏的方法來檢測動物源性食品中的金剛烷胺殘留。

電化學傳感器具有微型化，低能量要求，低成本，高靈敏性和快速響應等優點，在藥物殘留檢測領域已經引起了很大的關注。由于生物材料本身的特性，生物傳感器具有不穩定的缺點，所以在傳感器中選用合成的對應物來替代生物受體做為識別原件已經逐步的成為很多領域的研究焦點。分子印跡聚合物具有高的選擇性和親和力，廣泛用于對應物的合成，其優點是化學和物理性質穩定，廉價，制備容易。使用電化學方法在電極表面沉積分子印跡聚合物具有很多優點，比如制備簡單，膜的厚度可控，極高的重現性等。

目前用電沉積法制備金剛烷胺分子印跡膜傳感器及其應用研究尚未見報道。

發明內容

有鑒于此，本發明首次使用電沉積分子印跡聚合物膜電化學傳感器檢測動物源性食品中金剛烷胺殘留。本發明以鄰氨基苯硫酚為功能單體，以金剛烷胺為模板，用電沉積法，構建了對金剛烷胺具有專一選擇特性的分子印跡電化學傳感器。該傳感器提供了一種簡單，快速，特異性，便宜和靈敏的電化學方法來檢測動物源性食品中的金剛烷胺殘留。為達到上述目的，本發明創造的技術方案是這樣實現的：

一種金剛烷胺分子印跡膜電化學傳感器的制備方法，所述電化學傳感器包含工作電極、參比電極和對電極，所述工作電極的基底電極為金電極，參比電極為飽和氯化鉀電極，對電極為鉑絲電極，包括如下步驟：

(1)電極預處理；

(2)鄰氨基苯硫酚自組裝

將步驟(1)處理好的電極浸沒于50mL電聚合溶液中，放置過夜，用于形成鄰氨基苯硫酚自組裝單分子層；

所述電聚合溶液包括50mmolL^-1鄰氨基苯硫酚,10mmolL^-1金剛烷胺,5mmolL^-1四丁基高氯酸銨和10mmolL^-1鹽酸；

(3)靜電吸引

將單體自組裝的金電極取出后，用乙醇小心淋洗，以去除金電極表面未結合牢固的鄰氨基苯硫酚分子；再浸泡在上述的電聚合溶液中，于-0.8V下恒電位作用10min。

(4)電沉積

將恒電位處理后的金電極直接在上述的溶液中進行循環伏安掃描，電沉積形成聚鄰氨基苯硫酚分子印跡聚合物；(5)模板分子的洗脫

首先，將電沉積有聚合物膜的修飾電極在HCl溶液中，于+0.8V恒電位作用10min，然后，再分別在甲醇和雙蒸水中超聲10min,以便去除模板分子。

進一步，所述電極預處理是金電極表面使用0.50μm的金砂紙和0.05μm的氧化鋁小心拋光，然后浸沒于“Piranha”溶液中(30％H₂O₂:98％H₂SO₄＝1:3,v/v)5min,接著用雙蒸水清洗來去除其他的污染物；然后，將電極在0.05molL^-1H₂SO₄溶液中使用循環伏安法在-0.2V到+1.0V范圍內掃描，直到獲得穩定的電化學響應，然后在空氣中干燥；