[發明專利]一種聚合物囊泡掃描電鏡樣品的制備方法

在審

• 申請號: 201610257490.2
• 申請日: 2016-04-21
• 公開（公告）號: CN105716923A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發明（設計）人: 王林格;劉思琦
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 羅嘯秋

技術領域

本發明屬于檢測技術領域，具體涉及一種聚合物囊泡掃描電鏡樣品的制備 方法。

背景技術

聚合物囊泡是由兩親性嵌段共聚物分子自組裝形成一類具有球狀中空結構 的高分子有序組合體。聚合物囊泡的結構和性質，如穩定性、結構和功能性、 膜滲透性，在很大程度上都受到嵌段共聚物的特性影響。一般來說，聚合物囊 泡的膜可分為三層：兩個親水層和一個處于內外親水層間的疏水層，疏水層由 于內外表面的親水層而保持穩定。聚合物囊泡的粒徑大小一般為30nm～300nm 左右，也有的巨型囊泡粒徑大小甚至可達幾十微米。與低分子脂質體相比，聚 合物囊泡由于是由高分子構成，具有高穩定性；并因其結構特點具有非常廣泛 的應用，特別是在生物和化學領域有很大的應用潛能。例如：模擬生物膜、藥 物載體和可控釋放、微反應器等。

聚合物囊泡的表面形貌、粒徑大小和分布常用顯微鏡技術來表征。透射電 子顯微鏡(TEM)是表征聚合物囊泡形貌的最有效的手段之一，一般通過負染 色技術對聚合物囊泡進行染色，可以在TEM觀察中得到清晰且對比度較高的影 像。負染色技術的原理是用含有重金屬離子的染色劑增強了體系的導電性，從 而使圖像分辨率提高，有利于對聚合物囊泡的三層膜結構解析。掃描電子顯微 鏡(SEM)是另一種常用的微觀形貌表征手段，可以清楚地觀察到樣品的表面 形貌和結構，也被用于表征聚合物囊泡。通常，聚合物囊泡進行掃描電鏡樣品 制備時，由于高分子材料的導電性普遍較差，需對聚合物囊泡樣品表面噴金后 才能用掃描電鏡對聚合物囊泡進行觀察。但是，聚合物囊泡掃描電鏡樣品噴金 制備方法存在一定的缺點：由于金顆粒有一定的體積大小，會遮蓋一些聚合物 囊泡的表面形貌的精細結構，且會影響對納米尺寸的囊泡的觀察，從而造成對 聚合物囊泡形貌、尺寸信息的失真；此外，噴金設備不是一般實驗室的常用設 備，噴金制樣往往需要等待一定的時間。因此，急需提出一種快速、簡便、能 保留表面細微結構信息、可操作性強且不依賴噴金的聚合物囊泡掃描電鏡樣品 的制備方法。

發明內容

為了解決以上現有技術的缺點和不足之處，本發明的目的在于提供一種聚 合物囊泡掃描電鏡樣品的制備方法。所述制備方法根據重金屬離子染色高分子 材料后可增強體系導電性的原理，對聚合物囊泡進行浸染，獲得可直接進行掃 描電鏡觀察的樣品。

本發明目的通過以下技術方案實現：

一種聚合物囊泡掃描電鏡樣品的制備方法，包括以下制備步驟：

(1)染色劑溶液準備：稱取重金屬鹽于溶劑中攪拌或超聲溶解均勻，得到 染色劑溶液；

(2)樣品臺準備：在掃描電鏡的樣品臺上貼上導電膠，再附著一層基底材 料于導電膠上；

(3)樣品染色、干燥：取聚合物囊泡溶液和步驟(1)所得染色劑溶液滴 加于基底材料表面，干燥成膜，得到所述聚合物囊泡掃描電鏡樣品。所得樣品 可直接進行掃描電鏡的拍攝。

步驟(1)中所述的染色劑溶液是指質量百分含量為0.2％～2％的磷鎢酸鈉 水溶液或質量百分含量為0.25％～2％的乙酸雙氧鈾溶于乙醇和水的混合溶劑得 到的溶液。優選地，所述乙醇和水的混合溶劑中乙醇與水的體積比為4:1。

優選地，步驟(1)所述攪拌的轉速為100～800r/min，攪拌時間為5～60min； 所述超聲的功率為40～100W，超聲頻率為20～500kHz，超聲時間為5～15min。

優選地，步驟(2)中所述的基底材料為載玻片、鋁箔、云母片或導電膠。

優選地，步驟(3)所述聚合物囊泡由兩親性嵌段共聚物構成，嵌段共聚物 中親水鏈段為聚乙二醇(PEG)或聚2-甲基丙烯酸乙氧基磷酸膽堿(PMPC)， 疏水鏈段為聚乳酸(PLA)、聚己內酯(PCL)、聚2-二異丙胺基乙基甲基丙烯酸 酯(PDPA)、聚丁二烯(PBD)或聚苯乙烯(PS)；聚合物囊泡的尺寸為50nm～ 50μm。

步驟(3)中所述樣品染色、干燥的具體過程為：將聚合物囊泡溶液滴在基 底上，再滴加染色劑溶液混合，用濾紙吸去過量的混合溶液，使基底上只覆蓋 一層薄的混合溶液，干燥成膜，得到所述聚合物囊泡掃描電鏡樣品；或將聚合 物囊泡溶液滴在基底上后，先用濾紙吸去多余的聚合物囊泡溶液，待基底上剩 余聚合物囊泡溶液干燥后，再滴加染色劑溶液，干燥成膜，得到所述聚合物囊 泡掃描電鏡樣品。

優選地，所述的干燥是指常溫下自然干燥或用干燥氣體吹干。