[發(fā)明專利]一種與水稻江南晚穗瘟抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610250371.4 | 申請(qǐng)日： | 2016-04-21 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105713983B | 公開（公告）日： | 2019-03-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鮑永美;張紅生;王瑞森;黃驥;王建飛;王州飛;程金平 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 南京農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6895 | 分類號(hào)： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218 | 代理人： | 徐冬濤;李曉峰 |
| 地址： | 211225 江蘇省南京市溧*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 水稻 江南 晚穗瘟 抗性 基因 緊密 連鎖 分子 標(biāo)記 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種用于檢測(cè)與水稻稻瘟病抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記的引物對(duì)或引物對(duì)組，其特征在于所述的引物對(duì)為引物對(duì)B；所述的引物對(duì)組由引物對(duì)A和引物對(duì)B組成；所述引物對(duì)A 為由如SEQ ID NO.1所示的核苷酸片段和如SEQ ID NO.2所示的核苷酸片段組成的引物對(duì)；所述引物對(duì)B為由如SEQ ID NO.3所示的核苷酸片段和如SEQ ID NO.4所示的核苷酸片段組成的引物對(duì)。
2.引物對(duì)或引物對(duì)組在制備用于檢測(cè)或輔助檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因的試劑盒中的應(yīng)用，所述的引物對(duì)為引物對(duì)A或引物對(duì)B；所述的引物對(duì)組由引物對(duì)A和引物對(duì)B組成；所述引物對(duì)A 為由如SEQ ID NO.1所示的核苷酸片段和如SEQ ID NO.2所示的核苷酸片段組成的引物對(duì)；所述引物對(duì)B為由如SEQ ID NO.3所示的核苷酸片段和如SEQ ID NO.4所示的核苷酸片段組成的引物對(duì)。
3.一種用于檢測(cè)或輔助檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因的試劑盒，其特征在于該試劑盒包含有權(quán)利要求1所述的引物對(duì)或引物對(duì)組。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于檢測(cè)或輔助檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因的試劑盒，其特征在于該試劑盒還包含有PCR技術(shù)常用的試劑。
5.權(quán)利要求1中所述的引物對(duì)或引物對(duì)組、權(quán)利要求3或4中所述的試劑盒在檢測(cè)或輔助檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因或選擇水稻抗稻瘟病品種中的應(yīng)用。
6.一種檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因或選擇水稻抗稻瘟病品種的分子標(biāo)記方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）提取待測(cè)水稻樣品基因組DNA；
（2）以步驟（1）提取的基因組DNA 為模板，采用引物對(duì)或引物對(duì)組進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得PCR產(chǎn)物，所述的引物對(duì)為引物對(duì)A或引物對(duì)B；所述的引物對(duì)組由引物對(duì)A和引物對(duì)B組成；所述引物對(duì)A 為由如SEQ ID NO.1所示的核苷酸片段和如SEQ ID NO.2所示的核苷酸片段組成的引物對(duì)；所述引物對(duì)B為由如SEQ ID NO.3所示的核苷酸片段和如SEQ ID NO.4所示的核苷酸片段組成的引物對(duì)；
（3）檢測(cè)PCR產(chǎn)物如果擴(kuò)增出大小為117bp或/和162bp的分子標(biāo)記片段，標(biāo)志水稻樣品中晚穗瘟抗性基因
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因或選擇水稻抗稻瘟病品種的分子標(biāo)記方法，其特征在于所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系為： 10×含Mg2+的緩沖液 1.0 μl，4 pmol/μl的引物對(duì)或引物對(duì)組1 μl，2.5 mM dNTPs 0.2 μl，5 U/μl的Taq酶0.1 μl，10 ng/μl的水稻樣品基因組模板DNA 1 μl，加水至10 μl。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)水稻抗稻瘟病基因或選擇水稻抗稻瘟病品種的分子標(biāo)記方法，其特征在于所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性 5 分鐘后； 94 ℃變性30 秒，55 ℃退火30秒，72 ℃延伸1分鐘，循環(huán)35次；最后72 ℃延伸10分鐘。
9.權(quán)利要求6所述的方法在提高水稻抗稻瘟病品種育種進(jìn)程中的應(yīng)用。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，未經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610250371.4/1.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
