[發明專利]一種免疫細胞體外擴增培養的無血清培養基及其應用

在審

• 申請號: 201610250338.1
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105713873A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發明（設計）人: 喬志平;單磊
• 申請（專利權）人: 廣東艾時代生物科技有限責任公司
• 主分類號: C12N5/078
• 分類號: C12N5/078
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;白艷

1.一種用于培養細胞的無血清培養基，所述培養基包括重組人血白蛋白、重組人胰島素、重組人轉鐵蛋白、β-巰基乙醇、乙醇胺、膽固醇、亞油酸、油酸、硫酸銅、硫酸鋅、檸檬酸鐵和碳酸氫鈉。

2.根據權利要求1所述的無血清培養基，其特征在于：

所述重組人血白蛋白、所述重組人胰島素、所述重組人轉鐵蛋白、所述β-巰基乙醇、所述乙醇胺、所述膽固醇、所述亞油酸、所述油酸、所述硫酸銅、所述硫酸鋅、所述檸檬酸鐵和所述碳酸氫鈉的質量比為0.1-10g：1-50mg：5-200mg：1-10mg：1-50mg：1-100mg：0.1-5mg：0.1-5mg：0.0001-0.01mg：0.1-5mg：0.1-10mg：3.024g。

3.根據權利要求1或2所述的無血清培養基，其特征在于：

所述重組人血白蛋白、所述重組人胰島素、所述重組人轉鐵蛋白、所述β-巰基乙醇、所述乙醇胺、所述膽固醇、所述亞油酸、所述油酸、所述硫酸銅、所述硫酸鋅、所述檸檬酸鐵和所述碳酸氫鈉的質量比為4g：15mg：70mg：4mg：5mg：10mg：0.4mg：0.4mg：0.001mg：0.8mg：0.8mg：3.024g。

4.根據權利要求1-3中任一所述的無血清培養基，其特征在于：

所述培養基還包括基礎培養基、重組人γ-干擾素和重組人白細胞介素-2；

所述重組人γ-干擾素和所述重組人白細胞介素-2均在細胞培養的過程中加入。

5.根據權利要求1-4中任一所述的無血清培養基，其特征在于：

所述培養基的pH為6.8-7.2；

所述基礎培養基為細胞基礎培養基；所述細胞基礎培養基具體為IMDM基礎培養基。

6.根據權利要求1-5中任一所述的無血清培養基，其特征在于：

所述重組人血白蛋白在所述無血清培養基中的濃度為0.1-10g/L；

所述重組人胰島素在所述無血清培養基中的濃度為1-50mg/L；

所述重組人轉鐵蛋白在所述無血清培養基中的濃度為5-200mg/L；

所述β-巰基乙醇在所述無血清培養基中的濃度為1-10mg/L；

所述乙醇胺在所述無血清培養基中的濃度為1-50mg/L；

所述膽固醇在所述無血清培養基中的濃度為1-100mg/L；

所述亞油酸在所述無血清培養基中的濃度為0.1-5mg/L；

所述油酸在所述無血清培養基中的濃度為0.1-5mg/L；

所述硫酸銅在所述無血清培養基中的濃度為0.0001-0.01mg/L；

所述硫酸鋅在所述無血清培養基中的濃度為0.1-5mg/L；

所述檸檬酸鐵在所述無血清培養基中的濃度為0.1-10mg/L；

所述碳酸氫鈉在所述無血清培養基中的濃度為2.5-3.5g/L；

所述重組人γ-干擾素在所述無血清培養基中的濃度為100-1000IU/mL；

所述重組人白細胞介素-2在所述無血清培養基中的濃度為100-500IU/mL。

7.根據權利要求1-6中任一所述的無血清培養基，其特征在于：

所述重組人血白蛋白在所述無血清培養基中的濃度為4g/L；

所述重組人胰島素在所述無血清培養基中的濃度為15mg/L；

所述重組人轉鐵蛋白在所述無血清培養基中的濃度為70mg/L；

所述β-巰基乙醇在所述無血清培養基中的濃度為4mg/L；

所述乙醇胺在所述無血清培養基中的濃度為5mg/L；

所述膽固醇在所述無血清培養基中的濃度為10mg/L；

所述亞油酸在所述無血清培養基中的濃度為0.4mg/L；

所述油酸在所述無血清培養基中的濃度為0.4mg/L；

所述硫酸銅在所述無血清培養基中的濃度為0.001mg/L；

所述硫酸鋅在所述無血清培養基中的濃度為0.8mg/L；

所述檸檬酸鐵在所述無血清培養基中的濃度為0.8mg/L；

所述碳酸氫鈉在所述無血清培養基中的濃度為3.024g/L；

所述重組人γ-干擾素在所述無血清培養基中的濃度為600IU/mL；

所述重組人白細胞介素-2在所述無血清培養基中的濃度為300IU/mL。