[發(fā)明專利]百年草中黃酮類物質(zhì)提取工藝的篩選

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610249437.8
• 申請日: 2016-04-21
• 公開（公告）號: CN107304195A
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于航;張丹
• 申請（專利權(quán)）人: 遼寧藥聯(lián)制藥有限公司
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40;C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 沈陽杰克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司21207
• 代理人: 羅瑩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及仙人掌系植物百年草中黃酮類物質(zhì)提取工藝篩選的研究。

百年草是生長于韓國濟(jì)州島的一種仙人掌的果實(shí),果實(shí)本身為粉紅色,因此茶的顏色也頗為鮮艷,且無色素,用這種仙人掌的果實(shí)制成的茶,能治療消化不良。 百年草實(shí)的萃取物具有加速傷口愈合、使肌膚柔軟細(xì)膩、防止皮膚干燥、減少皺紋等神奇的功效，因?yàn)榘倌瓴輰?shí)富含抗氧化劑、核黃素和硫胺（維生素B1），是滋潤保養(yǎng)肌膚極佳的營養(yǎng)成分。此外，百年草實(shí)也能促進(jìn)人體正常纖維細(xì)胞的擴(kuò)散再生，不論對身體內(nèi)部還是表皮創(chuàng)傷的愈合都十分有幫助。顏色鮮艷的百年草實(shí)要經(jīng)過四年的成長才能成熟，但是這種等待是值得的。臨床實(shí)驗(yàn)指出，百年草實(shí)可以增加皮膚的柔軟度，減少歲月在皮膚上留下的痕跡。使用胸腺嘧啶脫氧核甘整合實(shí)驗(yàn)法，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)將百年草實(shí)萃取物配合使用時(shí)，正常人體纖維細(xì)胞的增殖會提高。這些結(jié)果對身體內(nèi)和在皮膚外表傷口愈合的研究都意義重大，但目前尚未有關(guān)于百年草中黃酮提取的系統(tǒng)方法。

本發(fā)明的目的是提供提取百年草中黃酮類物質(zhì)的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種百年草中黃酮類化合物的提取方法，它包括以下步驟：

A．將百年草研磨成果漿；

B．在70℃用40%乙醇提取40分鐘，液料比為20；

C．單因素考察，得到各因素對百年草果中黃酮類物質(zhì)提取率的影像效果，采用正交分解實(shí)驗(yàn)得出各因素對黃酮提取率影響的主次順序?yàn)椋禾崛舛?gt;提取時(shí)間>液料比>提取溫度；

D．得到百年草中黃酮類物質(zhì)的最佳提取條件為：提取濃度>提取時(shí)間>液料比>提取溫度；

具體實(shí)施方式：

1.將百年草研磨成果泥，準(zhǔn)確稱取1.0g 百年草于錐形瓶中，加入體積分?jǐn)?shù)50%的乙醇溶液30mL，在60℃的水浴中加熱20min，冷卻過濾至50mL 容量瓶中，用50% 的乙醇定容。移液管從容量瓶中吸取3mL 溶液，在420nm 的波長下測定吸光度。

2.提取百年草果黃酮類物質(zhì)單因素實(shí)驗(yàn)研究

A.提取時(shí)間的選擇:分別稱取1.0g百年草果于5個(gè)錐形瓶中，各加入20mL體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液，置于70℃水浴鍋中分別加熱10、20、30、40、50min，冷卻過濾至50mL容量瓶中，并用40%的乙醇定容，在420nm 的波長下測定吸光度。

B.料液比的選擇:分別稱取1.0g 百年草果于5個(gè)錐形瓶中，分別加入10、20、30、40、50mL 50%的乙醇溶液，在70℃水浴鍋中加熱20min，冷卻后過濾至50mL 容量瓶中，并用50% 的乙醇定容，在420nm的波長下測定吸光度。

C.提取液濃度的選擇:分別稱取1.0g 百年草果于5個(gè)錐形瓶中，依次加入20mL濃度分別為40%、50%、60%、70%、80%的乙醇溶液，在70℃水浴鍋中加熱20min，冷卻過濾至50mL容量瓶中，分別用相應(yīng)濃度的乙醇定容，在420nm的波長下測定吸光度。

D.提取溫度的選擇:分別稱取1.0g 百年草果于5 個(gè)錐形瓶中，各加入20mL 50% 的乙醇溶液，依次在40、50、60、70、80℃的水浴鍋中加熱20min，冷卻過濾至50mL 容量瓶中，用50% 的乙醇溶液定容，在420nm的波長下測定吸光度。

3.提取百年草果黃酮類物質(zhì)的多因素正交實(shí)

驗(yàn)根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以提取溫度、提取液濃度、料液比、提取時(shí)間為因素設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，以提取量為評價(jià)指標(biāo)，以確定最佳提取條件，正交實(shí)驗(yàn)因素水平如表1。

4.蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品0.0137g，用體積分?jǐn)?shù)40%的乙醇溶解，定容至50mL，得到濃度為0.274mg /mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。精確吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于6個(gè)25mL容量瓶中，各加入20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的AlCl3溶液，用體積分?jǐn)?shù)50%的乙醇定容至刻度，靜置10min后于420nm 處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。