[發明專利]蛋白激酶mTOR的S2481位點磷酸化作為腫瘤用藥的標志物

在審

• 申請號: 201610248698.8
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN107303297A
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發明（設計）人: 徐平;薛宇;徐鋒;劉澤先;衣泰龍;翟琳輝;徐忠偉
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所
• 主分類號: A61K31/436
• 分類號: A61K31/436;A61P35/00;G01N33/574
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司11245
• 代理人: 關暢,白艷

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及蛋白激酶mTOR的S2481位點磷酸化作為腫瘤用藥的標志物。

背景技術

肝細胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是世界范圍內最為流行的惡性腫瘤之一。在歐美國家，原發性的肝癌患者較少，且多由其他類型腫瘤的轉移到肝臟引發。而在東南亞地區和撒哈拉沙漠以南的地區，特別是在中國，肝癌患者則大多是原發性肝癌。肝癌發生發展的過程與多個基因的突變以及多條信號通路密切相關。針對這些分子機制，肝癌的靶向治療逐步受到重視。

Sorafenib是一類小分子抑制劑，能夠抑制多種蛋白激酶的活性，包括VEGFR、PDGFR以及Raf等。在2007年的ASCO會議上，Josep M.Llovet等人公布了sorafenib在肝癌中的臨床試驗治療效果。對于肝癌患者，sorafenib相比對照藥，其療效提高了44％，病人的平均存活時間延長了3個月。在2007年11月，美國FDA批準sorafenib作為晚期肝癌的一線用藥。Sorafenib的出現無疑給眾多肝癌患者帶來了希望，但是sorafenib的抗藥性使得其對于肝癌的總體治療效果仍然難以讓人滿意。有研究表明除了受sorafenib抑制的Raf通路在肝癌發生發展中有重要功能之外，mTOR信號通路與肝癌的發生發展也有密切的關系。Josep M.Llovet等人發現無論是在細胞水平還是動物模型的水平，聯合使用Raf通路的抑制劑sorafenib和mTOR通路的抑制劑rapamycin可以展現出更強的抗腫瘤效應。mTORC1能夠活化S6K，調控蛋白質的合成過程，促進細胞從G1期向S期轉變，從而促進肝癌細胞的增殖。此外，有15-41％的肝癌病人中mTOR通路是過度活化的。在肝癌的動物模型里，mTOR的抑制劑也具有抗腫瘤效應。日本國立癌癥研究院的Masuda等人利用大量不同的磷酸化位點特異性抗體，對肝癌患者的標本進行了大規模篩查，發現高水平的p-RPS6S235/236可能是sorafenib治療無效的分子標記。并且發現在sorafenib抵抗的肝癌細胞里，mTOR信號通路是活化的，mTOR的抑制劑能夠顯著抑制sorafenib抵抗的肝癌細胞的增殖。首都醫科大學附屬佑安醫院盧實春等人發現雷帕霉素(sirolimus，西羅莫司)能夠降低早中期肝癌病人肝移植術后的遠期腫瘤復發率，并提高其術后生存率。這些研究成果提示sorafenib和sirolimus都對肝癌患者有一定療效，但是在什么情況下使用哪一種藥物的個性化用藥依據目前未知。

胃癌在我國各種惡性腫瘤中居首位，胃癌發病有明顯的地域性差別，在我國的西北與東部沿海地區胃癌發病率比南方地區明顯為高。病因主要有地域環境及飲食生活 因素、幽門螺桿菌感染、癌前病變以及遺傳和基因等幾個因素。

蛋白激酶mTOR除了在肝癌組織中高表達以外，有證據表明mTOR在胃癌組織中也有異常表達。

發明內容

本發明的一個目的是提供mTOR信號通路抑制劑的用途。

本發明提供的mTOR信號通路抑制劑在如下1)-3)中至少一種中的應用：

1)制備抑制腫瘤細胞或腫瘤組織中mTOR S2481位點磷酸化水平的產品；

2)制備抑制腫瘤細胞增值的產品；

3)制備抑制器官移植后腫瘤患者復發的產品。

上述應用中，所述腫瘤細胞或腫瘤組織為mTOR S2481位點磷酸化水平高的腫瘤細胞或腫瘤組織。

所述腫瘤細胞為肝癌細胞或胃癌細胞；

所述腫瘤組織為肝癌組織或胃癌組織。

所述腫瘤細胞或腫瘤組織為mTOR S2481位點磷酸化水平高的腫瘤細胞或腫瘤組織；mTOR S2481位點磷酸化水平高的腫瘤細胞為HCCLM6細胞；mTOR S2481位點磷酸化水平高的腫瘤組織為中期或晚期病人的腫瘤組織。

mTOR S2481位點磷酸化水平高的腫瘤細胞或腫瘤組織為滿足如下的樣品：

樣品的質譜數據通過生物信息學的計算方法，符合如下1)-3)全部：

1)、腫瘤細胞或腫瘤組織中mTOR底物位點占磷酸化網絡位點的比值，這個值>14％

2)、腫瘤細胞或腫瘤組織中mTOR底物位點數目與癌旁中比值，這個值>1.2

3)、做卡方檢驗的p值<0.05。

反之，不符合1)-3)全部，則不為mTOR S2481位點磷酸化水平高。