[發(fā)明專利]一種修復(fù)重金屬污染土壤的微生物菌株的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610248561.2
• 申請(qǐng)日: 2016-04-20
• 公開（公告）號(hào): CN105670980B
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何聲寶;張威;羅安娜;劉楠;王英元;馮曉民
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心;中國(guó)煙草總公司廣西壯族自治區(qū)公司;清華大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，公開了一種修復(fù)重金屬污染土壤的微生物菌株及其應(yīng)用。本發(fā)明所述微生物菌株保藏編號(hào)為CGMCC No.10843。本發(fā)明從受重金屬鎘污染的土壤中篩選出一株洋蔥伯克霍爾德氏菌，其能夠?qū)⑼寥乐械目山粨Q態(tài)鎘鈍化顯著降低其含量，對(duì)鎘具有極強(qiáng)的耐受性，對(duì)土壤擾動(dòng)小，具有較強(qiáng)的生物修復(fù)功能，同時(shí)能夠提高土壤脫氫酶的活性，能夠應(yīng)用于修復(fù)重金屬污染土壤和提高土壤脫氫酶活性以及相關(guān)產(chǎn)品的制備中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，具體的說(shuō)是涉及一種修復(fù)重金屬污染土壤的微生物菌株及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

由于長(zhǎng)期的礦山開采，金屬冶煉以及含磷農(nóng)藥的施用，土壤中富集了大量重金屬污染物。重金屬污染土壤具有隱蔽性，累積性和滯后性，因此不易引起重視。近年來(lái)，我國(guó)重金屬污染土壤問(wèn)題日益突出，對(duì)耕地土壤質(zhì)量和民生健康安全造成極大威脅。我國(guó)環(huán)境保護(hù)部和國(guó)土資源部對(duì)全國(guó)土壤污染情況的調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)土壤受鎘、砷、鉛、鉻、鎳等重金屬污染嚴(yán)重，污染場(chǎng)地面積近2萬(wàn)公頃，約占耕地總面積的1/5，其中全國(guó)土壤重金屬鎘的超標(biāo)率最高，達(dá)到了7％。因此，鎘污染的治理成為當(dāng)前土壤污染領(lǐng)域亟待解決的重要問(wèn)題之一。

重金屬鎘作為機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育非必需元素，是對(duì)植物、動(dòng)物及人類毒性最強(qiáng)的重金屬元素之一。重金屬鎘經(jīng)過(guò)食物鏈產(chǎn)生生物放大作用，在較高級(jí)的生物體中富集起來(lái)，然后通過(guò)食物等渠道進(jìn)入人體。當(dāng)重金屬鎘在人體內(nèi)積累到一定限度，會(huì)造成人體急性或慢性中毒，對(duì)人體器官特別是腎臟造成很大的危害。

重金屬污染土壤的修復(fù)方法可分為物理法、化學(xué)法以及生物法。物理方法往往工程量大，能耗大；化學(xué)方法大多花費(fèi)高，易造成二次污染；生物法中的植物修復(fù)受到較多研究人員的青睞，但植物生長(zhǎng)緩慢，修復(fù)周期長(zhǎng)。目前比較受關(guān)注的修復(fù)技術(shù)大多處于實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)階段，且實(shí)驗(yàn)效果也不夠理想，在實(shí)地修復(fù)中，我國(guó)并沒(méi)有很好的成功案例。因此，尋找一種高效節(jié)能，經(jīng)濟(jì)環(huán)保的修復(fù)措施至關(guān)重要。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種修復(fù)重金屬污染土壤的微生物菌株及其應(yīng)用，使得所述微生物菌株對(duì)土壤中重金屬鎘具有較強(qiáng)的鈍化作用以及耐受作用，通過(guò)鈍化作用將鎘固定在污染土壤中，降低鎘的生物有效性，減少植物對(duì)其吸收利用，從而達(dá)到修復(fù)污染土壤的目的；

本發(fā)明的另一個(gè)發(fā)明目的在于提供一種修復(fù)重金屬污染土壤的微生物菌株及其應(yīng)用，使得所述微生物菌株能夠提高土壤中，特別是重金屬污染的土壤中的土壤脫氫酶活性，改善土壤微生態(tài)環(huán)境。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有治理重金屬污染土壤的物理化學(xué)方法具有一定局限性，實(shí)施成本高，并且對(duì)土壤破壞嚴(yán)重，易帶來(lái)其他污染的問(wèn)題。通過(guò)利用功能性微生物菌株的生物鈍化作用來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)污染土壤的原位修復(fù)，具有成本低、效果好、操作方便、對(duì)土壤擾動(dòng)小等特點(diǎn)。

本發(fā)明利用液相富集法對(duì)鎘鈍化菌株進(jìn)行了篩選。

液相富集法：稱取適量鎘污染土壤樣品加入到裝有LB液體培養(yǎng)基的三角瓶中，加入適量玻璃珠。將三角瓶在28-30℃，150-170rpm下振蕩；將土壤混合液轉(zhuǎn)入離心管，取離心后的上清液作為鎘鈍化微生物的來(lái)源。將上述上清液接種到含有鎘的LB液體培養(yǎng)基中，在28-30℃，150-170rpm下振蕩培養(yǎng)。用無(wú)菌吸管吸取1-2mL，移入另一個(gè)富集培養(yǎng)三角瓶中。如此轉(zhuǎn)移三次后，分別在LB固體培養(yǎng)基和無(wú)機(jī)鹽固體培養(yǎng)基上進(jìn)行平板劃線，分離單菌落。