[發明專利]從高豐度15N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-15N4的方法

有效

• 申請號: 201610247457.1
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105732436A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 任征;侯捷;岳韓笑;侯靜華;張亮;劉占峰;雷雯;宋明鳴
• 申請（專利權）人: 上?；ぱ芯吭?/a>
• 主分類號: C07C277/08
• 分類號: C07C277/08;C07C279/14
• 代理公司: 上?？剖⒅R產權代理有限公司 31225
• 代理人: 陳亮

1.從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，采用以下步驟：

(1)精氨酸的富集除雜

調節L-精氨酸-¹⁵N₄的發酵液的pH為1～5，離心得到上清液，取色譜柱體積一半的上清液用恒流泵上樣，上樣速度5～100ml/min，控制流出液不含精氨酸，上樣結束后立即用蒸餾水沖洗色譜柱去除部分色素雜質，在檢測器讀數不下降時采用0.01～2.0mol/L的氨水洗脫，收集最后一個組分即為精氨酸粗品溶液；

(2)精氨酸的精制

色譜柱用蒸餾水沖洗至中性，將得到的精氨酸粗品溶液在60℃真空濃縮，用鹽酸溶液調節pH為1～5，用恒流泵上樣，上樣結束后立即用蒸餾水沖洗色譜柱，在檢測器讀數不下降時采用0.01～1.0mol/L氨水洗脫，收集最后一個組分即為L-精氨酸-¹⁵N₄單品，將該單品趕氨濃縮，活性炭脫色再濃縮，加入無水乙醇結晶，真空干燥結晶得到L-精氨酸-¹⁵N₄。

2.根據權利要求1所述的從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，步驟(1)中L-精氨酸-¹⁵N₄的發酵液的pH值調節為2～3。

3.根據權利要求1所述的從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，步驟(1)中氨水濃度為0.1～1.0mol/L，優選為0.1～0.5mol/L。

4.根據權利要求1所述的從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，步驟(2)中L-精氨酸-¹⁵N₄的發酵液的pH值調節為2～3。

5.根據權利要求1所述的從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，步驟(2)中氨水濃度為0.01～0.06mol/L，優選為0.02～0.05mol/L。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，所述的色譜柱為玻璃柱，柱子的長寬比為，15:1～20:1，體積為200～4000ml。

7.根據權利要求6所述的從高豐度¹⁵N同位素標記L-精氨酸發酵液中提取高豐度L-精氨酸-¹⁵N₄的方法，其特征在于，所述的色譜柱含有-CH₂SO₃^-、粒徑20～100nm的聚合物填料。