[發明專利]檢測人HK2基因的表達水平的特異引物對及其應用

在審

• 申請號: 201610247444.4
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105695458A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 張函槊;李娟
• 申請（專利權）人: 蘇州吉諾瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及檢測人HK2基因的表達水平的特異引物對及 其應用。

背景技術

食管癌是常見的消化道腫瘤，發病率僅次于胃癌。在我國農村，食管癌是發病率最 高的腫瘤。現已證實食管癌早期發現手術治療切除率可達100％，5年生存率可達90％以上， 但是目前就診患者中多數以達中、晚期，因此治療食管癌關鍵在于早發現、早診斷、早治療。 目前食管癌的普查方法主要是食管拉網細胞學檢查和復方碘溶液內鏡下粘膜染色檢查，其 靈敏度和特異性都不理想，因此尋找新的食管癌診斷標志物至關重要。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何鑒定或輔助鑒定待測患者是否為食管癌患者。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了特異引物對甲。

本發明所提供的特異引物對甲，由用于擴增特異DNA片段的兩條引物組成；所述特 異DNA片段中具有人基因組中引物HK2-F和引物HK2-R組成的引物對的靶序列。

所述引物HK2-F可為如下a1)或a2)：

a1)序列表的序列1所示的單鏈DNA分子；

a2)將序列1經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列1具有相 同功能的DNA分子。

所述引物HK2-R可為如下a3)或a4)：

a3)序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；

a4)將序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列2具有相 同功能的DNA分子。

所述特異引物對甲具體可由所述引物HK2-F和所述引物HK2-R組成。

上述任一所述特異引物對甲在制備產品中的應用也屬于本發明的保護范圍；所述 產品的功能可為如下b1)或b2)或b3)或b4)：

b1)鑒定或輔助鑒定食管癌；

b2)鑒定或輔助鑒定待測患者是否為食管癌患者；

b3)檢測人HK2基因；

b4)檢測人HK2基因的表達水平。

為解決上述技術問題，本發明還提供了一種產品。

本發明所提供的產品，其含有上述任一所述特異引物對甲；所述產品的功能可為 如下b1)或b2)或b3)或b4)：

b1)鑒定或輔助鑒定食管癌；

b2)鑒定或輔助鑒定待測患者是否為食管癌患者；

b3)檢測人HK2基因；

b4)檢測人HK2基因的表達水平。

所述產品中還可含有特異引物對乙；所述特異引物對乙的靶序列可位于人的內參 基因中。

上述產品中，所述內參基因可為人GAPDH基因、人β-actin基因或人18s-rRNA基因。

上述產品中，所述特異引物對乙具體可由引物GAPDH-F和引物GAPDH-R組成；

所述引物GAPDH-F可為如下c1)或c2)：

c1)序列表的序列3所示的單鏈DNA分子；

c2)將序列3經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列3具有相 同功能的DNA分子；

所述引物GAPDH-R可為如下c3)或c4)：

c3)序列表的序列4所示的單鏈DNA分子；

c4)將序列4經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列4具有相 同功能的DNA分子。

上述產品中還可包括具有如下f1)或f2)或f3)或f4)或f5)或f6)或f7)或f8)或f9) 或f10)的數據處理和結論顯示功能的裝置：

f1)比較同一個體中的待測組織和正常組織中人HK2基因的表達量，如果所述待測 組織中所述人HK2基因的表達量高于所述正常組織、則所述待測組織為或候選為腫瘤組織， 如果所述待測組織中所述人HK2基因的表達量為所述正常組織以下、則所述待測組織不為 或候選不為腫瘤組織；

f2)比較同一個體中的待測組織和正常組織中人HK2基因參比內參基因的相對表 達量，如果所述待測組織中所述人HK2基因參比內參基因的相對表達量高于所述正常組織、 則所述待測組織為或候選為腫瘤組織，如果所述待測組織中所述人HK2基因參比內參基因 的相對表達量為所述正常組織以下、則所述待測組織不為或候選不為腫瘤組織；