[發明專利]用兩性株自交制備純合親本與超雄進行雜交育種的方法

在審

• 申請號: 201610246630.6
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105724244A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 劉正杰;毛自朝;林春;張園;王樂;徐紹忠;李和洲
• 申請（專利權）人: 云南農業大學;昆明市東川區成長農業科技開發有限責任公司
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 楊宏珍

1.一種用兩性株自交制備純合親本進行雜交育種的方法，其特征在于該方法的具體步驟如下：

一、蘆筍兩性株的選取與開花觀察

蘆筍大棚中的蘆筍開始開花時，選取出現花朵中雌蕊退化不完全的雄性植株，掛牌標記；將雌蕊退化不完全的雄性植株花朵摘下，在解剖鏡下觀察其雌蕊結構，判定其雌性育性是否恢復，若恢復則繼續觀察，若未恢復則不予選取；對于初步鑒定的植株，繼續觀察其后續開花情況，如仍然會出現部分花朵中雌蕊退化不完全，恢復其雌性育性時，則將該植株標記為兩性株；

二.雜交育種的實施

(1)兩性花選擇與自交

選擇生長健壯、無病無害的雄性兩性株，做好標識；根據所選擇的兩性株及其開花習性，選擇兩性花進行自交并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子保存；

(2)兩性花自交種播種與自交純化

將通過自交獲得的兩性株種子播種，經苗期和成株期，在成株期現蕾或開花時，找到雄株兩性株，對兩性花進行自交，并做好標記；待自交的花朵結出果實并成熟后，收獲種子，再次進行上述方式的播種與自交，如此自交3～4個世代后，得到純合的自交種子；

(3)雜交與雜交種的獲得

將獲得的自交3～4個世代后的純合的自交種子播種，待其長至成株期；在成株期現蕾或開花時，在田間找到雌株與超雄株；在上午的7:30～8:30，將超雄株的剛開放的花摘下，用鑷子輕輕敲打花藥，將花藥收集在一個玻璃杯內；隨即用毛筆蘸刷花藥在純合雌株的雌花柱頭上，授粉工作需做6～7天；完成人工輔助授粉后，將授粉后的花朵標記并套上牛皮紙袋子直到種子成熟；

(4)雜交后的管理

雜交之后，每隔兩天將新長出的花立即摘除，共檢查5次；在雜交期間，為保證授粉花朵正常發育，需經常檢查；

(5)收獲管理

在雜交種子果實變紅成熟時，將雜交的果實摘下，放在牛皮紙袋中，置于陽光下曬2～3天，后取出果實中的種子，置于干燥的牛皮紙袋中。