[發明專利]一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法

在審

• 申請號: 201610245821.0
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105777927A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 蔣冠偉
• 申請（專利權）人: 江蘇長運生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P31/12;A61P37/04;A61P1/14;A61P1/00;A61P3/00
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 蔣常雪

1.一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于：以新鮮烏飯樹葉和藍莓葉為原料，采用超聲波技術實施細胞破碎，以堿性溶液實施多糖提取，以復合生物酶實施粗糖提純，得到純天然的植物多糖。

2.如權利要求1所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于，所述方法包括下列步驟：

1）烏飯樹葉和藍莓葉細胞壁破壁；

2）烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖粗步分離；

3）烏飯樹葉多糖的進一步純化；

4）藍莓葉多糖的進一步純化。

3.如權利要求1或2所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于，所述烏飯樹葉和藍莓葉細胞壁破壁過程為：以烏飯樹葉和藍莓葉為原料，對新鮮烏飯樹葉和藍莓葉進行清洗后，采用超聲波破碎法實施細胞壁破壁，選擇超聲波的頻率為50kHz，實施超聲波破碎3次，每次10分鐘；然后在破碎液中加入重量比1:1的純化水，進入膠體磨研磨，選擇研磨細度為10μm、研磨5次；接著將研磨液在-15℃環境下冷凍1小時，再置于80℃水中驟然升溫使其融化，升溫作用15分鐘，待研磨液冷卻至室溫后再將其放入-15℃環境下冷凍1小時，如此反復3次。

4.如權利要求1或2所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于，所述烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖粗步分離過程為：首先，采用重量濃度為1%的KOH溶液，按照KOH溶液與細胞壁液的質量比為4:1的標準，將處理后的破壁細胞壁液在溫度為4℃的氮氣保護下攪拌萃取20小時；其次，將萃取液經過離心取上清液；再次，用KOH溶液對沉淀物重復萃取2次，并取上清液；最后將提取的上清液經過超濾、冷凍、干燥即得烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖粗品。

5.如權利要求1或2所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于，所述烏飯樹葉多糖的進一步純化過程為：首先，按照復合酶A與烏飯樹葉多糖粗品的質量比為萬分之五的標準，采用復合酶A對烏飯樹葉多糖粗品在55℃、pH值為7.8的條件下處理6小時；其次，在處理后的溶液中加入95%乙醇至乙醇重量濃度為50%，離心后取沉淀；再次，對沉淀物加水復溶后，加入95%乙醇至乙醇重量濃度為70%，進行二次醇沉；最后，經離心獲得的沉淀物即為烏飯樹葉多糖產品。

6.如權利要求1或2所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于，所述藍莓葉多糖的進一步純化過程為：首先，按照復合酶B與藍莓樹葉多糖粗品的質量比為萬分之五的標準，采用復合酶B對藍莓葉多糖粗品在50℃、pH值為7.5條件下處理4小時；其次，在處理后的溶液中加入95%乙醇至乙醇重量濃度為50%，離心后取沉淀；再次，對沉淀物加水復溶后，加入95%乙醇至乙醇重量濃度為70%，進行二次醇沉；最后，經離心獲得的沉淀物即為藍莓葉多糖產品。

7.如權利要求1、2或5所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于：所述復合酶A為鏈霉蛋白酶、果膠酶和纖維酶，各種酶的質量比為1:2:2。

8.如權利要求1、2或6所述的一種烏飯樹葉多糖和藍莓葉多糖的分離純化方法，其特征在于：所述復合酶B是組織蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶，各種酶的質量比為1:2:1。