[發明專利]一種從鐮形棘豆中分離制備5種黃酮類化合物的方法

有效

• 申請號: 201610244243.9
• 申請日: 2016-04-19
• 公開（公告）號: CN105884736B
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 陳晨;李玉林;陳濤;劉永玲;李紅梅
• 申請（專利權）人: 中國科學院西北高原生物研究所
• 主分類號: C07D311/32
• 分類號: C07D311/32;C07D311/30;C07D311/40;C07C49/83;C07C49/835;C07C45/79;B01D15/18
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙)51222
• 代理人: 李高峽

1.一種從鐮形棘豆中分離制備5種黃酮類化合物的方法，其特征在于：所述5種黃酮類化合物為7-羥基二氫黃酮、5,7-二羥基-4’-甲氧黃酮醇、5,7–二羥基雙氫黃酮、2’,4’-二羥基-查爾酮和2’,4’-二羥基二氫查爾酮，包括以下步驟：

利用高速逆流色譜法分離制備5種黃酮類化合物：

(a)取鐮形棘豆提取物，溶于進樣溶劑中，制備得到進樣溶液；

(b)將進樣溶液注入高速逆流色譜儀，檢測收集所述5種黃酮類化合物的流分，除去溶劑，即得7-羥基二氫黃酮、5,7-二羥基-4’-甲氧黃酮醇、5,7-二羥基雙氫黃酮、2’,4’-二羥基-查爾酮和2’,4’-二羥基二氫查爾酮；

所述高速逆流色譜法的固定相為兩相溶劑體系的上相，流動相為兩相溶劑體系的下相；所述兩相溶劑體系由正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水＝10:4:10:10(v/v)組成；

所述鐮形棘豆提取物由下述方法制備得到：

(1)取鐮形棘豆，5-95％的乙醇提取，合并提取液，回收乙醇得到鐮形棘豆乙醇粗提物；

(2)將步驟(1)中的乙醇粗提物加水溶解，依次用石油醚和乙酸乙酯洗滌水相，將洗滌后的水相上大孔吸附樹脂，依次用水、20～80％的乙醇作為洗脫液梯度洗脫，收集80％的乙醇洗脫液，回收乙醇即得。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述進樣溶劑是由所述上相和下相按照1:1的體積比組成的溶劑；所述進樣溶劑與提取物的體積質量比為1:1～1:30mL/mg。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述高速逆流色譜儀中分離管的轉速為700-900rpm。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述流動相的流速為1.5-4mL/min。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述檢測的波長為210-400nm。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述檢測的波長為280nm。

7.據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟(a)的鐮形棘豆提取物中，其含有不低于8％w/w的7-羥基二氫黃酮，不低于7.5％w/w的5,7-二羥基-4’-甲氧黃酮醇，不低于11％w/w的5,7-二羥基雙氫黃酮，不低于19％w/w的2’,4’-二羥基-查爾酮和不低于13％w/w的2’,4’-二羥基二氫查爾酮。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟(1)中采用75％的乙醇提取。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的梯度洗脫是依次用水、20％的乙醇、40％的乙醇、60％的乙醇、80％的乙醇作為洗脫液梯度洗脫，洗脫體積為2～50倍柱床體積。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述洗脫體積為20倍柱床體積。