[發(fā)明專利]無菌培養(yǎng)牛樟芝子實體的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610242490.5
• 申請日: 2016-04-19
• 公開（公告）號: CN107302867A
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發(fā)明（設計）人: 陳秀男
• 申請（專利權(quán)）人: 陳秀男
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C05G3/00
• 代理公司: 北京戈程知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11314
• 代理人: 程偉

技術領域

本發(fā)明關于一種培養(yǎng)牛樟芝子實體的方法，尤指一種無菌培養(yǎng)牛樟芝子實體的方法。

背景技術

牛樟芝(Antrodia cinnamomea)屬于非褶菌目、多孔菌科、薄孔菌屬、樟芝種，乃多年生蕈菌類。樟芝為一種木材腐朽真菌，只生長在臺灣本土的老齡牛樟樹上。菇體表面孔狀，初生時鮮紅色，漸長變?yōu)槿榘咨?、淡紅褐色、淡褐色或淡黃褐色，子實體于牛樟樹干的中空內(nèi)部長出，亦有自倒伏牛樟樹枯木底部長出者，有強烈的牛樟香味。

牛樟芝一直以來被視為珍貴的真菌類藥材，在許多研究中發(fā)現(xiàn)，三帖類化合物(Triterpenoids)是牛樟芝最重要的成分之一，并且牛樟芝的三帖類化合物含量遠超過靈芝。此外，牛樟芝中所含有的其他化合物，例如多糖體、超氧歧化酶、腺苷、β-D-葡聚糖等生理活性成分，皆對于人體生理機能可發(fā)揮均衡保健的功效。三萜類的主要功能有抑制癌細胞的生長、抑制組織胺的釋放，防止過敏、促進肝功能、促進血小板凝集、以及降血脂等作用。三萜類的含量及種類愈多，則愈有醫(yī)療價值。從實驗證實：三萜類化合物能抑制肝癌細胞的增殖。高血壓患者往往因為血壓高，導致腦血管破裂而中風，三萜類化合物能有效的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)的活性，進而降低血壓。另外三萜類也具有抗發(fā)炎的功用。

由于牛樟樹已列入國家保育類植物，不準砍伐，牛樟芝采集不易，且品質(zhì)不一。另外由于環(huán)境污染日漸嚴重，天然野生樟芝可能多少含有重金屬污染。因此近年來多以人工栽培方法來培養(yǎng)牛樟芝。根據(jù)TWI422680揭示，習知的人工栽培方法包括椴木栽培法、固態(tài)栽培法以及液態(tài)發(fā)酵法。

然而，椴木栽培法無法在無菌的環(huán)境中進行，因此容易受到其他 微生物的污染，且椴木來源不易控管，也有受到污染的可能。椴木栽培法的牛樟芝在動物實驗結(jié)果中顯示具有腎上腺毒性，也會造成老鼠肝臟與卵巢的重量增加。

固態(tài)培養(yǎng)法主要是利用含有營養(yǎng)物質(zhì)的太空包來培養(yǎng)牛樟芝(即既有栽培香菇的方法)，所得到的牛樟芝其外觀雖然與野生及/或椴木栽培的牛樟芝相似，但其三帖類化合物的含量低，并且其他主要成分與野生及/或椴木栽培的牛樟芝子實體并不相同。

再者，一般藉由液態(tài)發(fā)酵法培養(yǎng)牛樟芝雖然可在短時間內(nèi)收成牛樟芝液體發(fā)酵產(chǎn)品，但其主要產(chǎn)物為多糖類，并不含有三帖類化合物，并且其他主要成分與野生及/或椴木栽培的牛樟芝子實體相去甚遠。

有鑒于此，必須提供一種新穎的牛樟芝子實體培養(yǎng)方法，在無菌的環(huán)境下可有效的培養(yǎng)出牛樟芝子實體，并且其主要成分如三帖類化合物與野生及/或椴木栽培的牛樟芝相似，以有效達到人體保健的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種培養(yǎng)牛樟芝子實體的方法，包括：將牛樟芝菌種接菌至經(jīng)滅菌的瓊脂培養(yǎng)基，以繼代培養(yǎng)產(chǎn)生次級菌絲體，并于該繼代培養(yǎng)過程中篩選出無變種及無毒性的次級菌絲體，以及，以該經(jīng)篩選出無變種及無毒性的次級菌絲體進行該繼代培養(yǎng)，以產(chǎn)生子實體。

前述瓊脂培養(yǎng)基包含：YM瓊脂培養(yǎng)基質(zhì)；食用油，且以該瓊脂培養(yǎng)基總重計，該食用油的含量為大于0％至1％；以及酵母提取物，且以該瓊脂培養(yǎng)基總重計，該酵母提取物的含量為大于3％至5％。前述瓊脂培養(yǎng)基中的其余組份為水。

本發(fā)明還提供一種培養(yǎng)牛樟芝子實體的方法，是在該瓊脂培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)，以產(chǎn)生無變種及無毒性的次級菌絲體及子實體以后，又自該瓊脂培養(yǎng)基篩選出該無變種及無毒性的次級菌絲體及/或子實體，并接種該無變種及無毒性的次級菌絲體及/或子實體至容器內(nèi)的經(jīng)滅菌的固態(tài)培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)出次級菌絲體及子實體。

前述固態(tài)培養(yǎng)基包含至少一種谷物的固態(tài)部分；以及含有糖類化合物、酵母提取物、及食用油的液態(tài)部分，其中，以該液態(tài)部分總重 計，該糖類化合物的含量為3％至5％，該酵母提取物的含量為3％至5％，及該食用油的含量為大于0％至1％，且該液態(tài)部分在該容器內(nèi)的高度為自該固態(tài)部分的半高處至與該固態(tài)部分頂面等高處。前述固態(tài)培養(yǎng)基中的其余組份為水。

本發(fā)明還提供一種培養(yǎng)牛樟芝子實體的方法，是在該瓊脂培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)，以產(chǎn)生無變種及無毒性的次級菌絲體以后，自該瓊脂培養(yǎng)基取出該無變種及無毒性的次級菌絲體，并接種該無變種及無毒性的次級菌絲體至容器內(nèi)的經(jīng)滅菌的液態(tài)培養(yǎng)基培養(yǎng)出子實體，其中，該液態(tài)培養(yǎng)基包含：糖類化合物；酵母提取物；以及食用油，其中，以該液態(tài)培養(yǎng)基總重計，該糖類化合物的含量為3％至5％，該酵母提取物的含量為3％至5％，及該食用油的含量為大于0％至1％。