[發(fā)明專利]胡桃醌在制備TRAIL增敏劑中的用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610242271.7
• 申請日: 2016-04-19
• 公開（公告）號: CN107303289A
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉英超;陳燕;吳金峰;葛明旭
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省立醫(yī)院
• 主分類號: A61K31/122
• 分類號: A61K31/122;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)31268
• 代理人: 吳桂琴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及天然藥物活性成分胡桃醌新的藥用用途，具體涉及胡桃醌在制備TRAIL增敏劑中的用途。

背景技術(shù)

有關(guān)文獻公開了腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體(Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是腫瘤壞死因子超家族的新成員。研究顯示，所述的TRAIL與死亡受體結(jié)合,通過多種信號傳導(dǎo)通路,誘導(dǎo)腫瘤細胞發(fā)生快速、高效的凋亡反應(yīng),而對正常細胞無明顯毒性,有望成為一種新的腫瘤治療手段。然而越來越多的研究表明,有若干腫瘤細胞對TRAIL的凋亡作用敏感性較低甚至完全耐受，因此，對TRAIL抗腫瘤療效增敏顯得十分必要。

胡桃醌存在于胡桃科植物胡桃及其同屬植物黑核桃的未成熟的外果皮中。近年來的研究發(fā)現(xiàn)胡桃醌具有抗真菌、抗衣原體或抗HIV病毒、抗腫瘤、降血糖等生物活性。迄今，尚未見有關(guān)胡桃醌作為TRAIL增敏劑的報道。

基于現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀，本申請的發(fā)明人擬提供天然藥物活性成分胡桃醌新的藥用用途，尤其是胡桃醌在制備TRAIL增敏劑中的用途。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供天然藥物活性成分胡桃醌新的藥用用途，尤其涉及胡桃醌在制備TRAIL增敏劑中的用途。

本發(fā)明所述的胡桃醌具有如下化學(xué)結(jié)構(gòu)：

本申請進行了細胞試驗，本發(fā)明的實施例中優(yōu)選人黑色素瘤細胞株MEWO和A2058，分別檢測單獨應(yīng)用TRAIL以及聯(lián)合應(yīng)用胡桃醌和TRAIL對上述細胞株的細胞毒性影響，以及對細胞凋亡及凋亡相關(guān)蛋白表達的影響，結(jié)果顯示：單獨應(yīng)用TRAIL對人黑色素瘤細胞株(MEWO和A2058)細胞增殖和凋亡無明顯作用；胡桃醌和TRAIL聯(lián)合應(yīng)用能顯著增強后者對上述兩種腫瘤細胞株的殺傷作用。

本發(fā)明進一步提供一種具有TRAIL增敏作用的藥物組合物，其包括作為活性成分的胡桃醌，以及藥物學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明中，所述的藥物組合物中作為活性成分的胡桃醌可用于多種腫瘤的TRAIL增敏；本發(fā)明中，優(yōu)選的腫瘤是黑色素瘤。

附圖說明

圖1，胡桃醌增強TRAIL對腫瘤細胞的殺傷作用，

其中，A，胡桃醌化學(xué)結(jié)構(gòu)圖；B藥物對MEWO細胞殺傷率；C，藥物對A2058的殺傷率；T為TRAIL的縮寫，濃度為25nM，JL為胡桃醌縮寫。

圖2，胡桃醌增強TRAIL對腫瘤細胞的誘導(dǎo)凋亡作用，

其中，A，藥物對MEWO細胞凋亡影響(流式圖)；B，藥物對A2058細胞的凋亡影響(流式圖)；C，藥物對MEWO和A2058凋亡影響(凋亡率統(tǒng)計圖)；T為TRAIL的縮寫，濃度為25nM，JL為胡桃醌縮寫，濃度為20μM。

圖3.胡桃醌增強TRAIL對腫瘤細胞的促凋亡蛋白表達，

其中，A，藥物對A2058細胞促凋亡蛋白PARP和caspase 3的影響(wesetern blot圖)；B，藥物對A2058細胞促凋亡蛋白(PARP、cleaved PARP)的影響(灰度值統(tǒng)計圖)；C，藥物對A2058細胞促凋亡蛋白(caspase3和cleaved caspse 3)的影響(灰度值統(tǒng)計圖)；T為TRAIL的縮寫，濃度為25nM。JL為胡桃醌縮寫，濃度為20μM。

具體實施方式

實施例1

材料與方法：

1.細胞株：人黑色素瘤細胞株(MEWO、A2058)均購自ATCC。上述細胞株用含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基在37℃、體積分數(shù)為5％CO₂、完全飽和濕度條件下常規(guī)培養(yǎng)，48h更換培養(yǎng)基，細胞生長達飽合狀態(tài)時，用0.25％胰蛋白酶+0.02％EDTA消化傳代，2～3d傳代1次，實驗選用對數(shù)生長期細胞。