[發明專利]一種中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白的檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201610242211.5
• 申請日: 2016-04-19
• 公開（公告）號: CN105699665A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 梅義武;劉興;葉佳穎
• 申請（專利權）人: 浙江卓運生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，具體而言，涉及檢測一種中性粒細胞明膠酶相關脂質 運載蛋白的檢測試劑盒。

背景技術

隨著人民生活水平的不斷提高，以及生活習慣和飲食習慣的逐漸改變，腎臟疾病 的發病率逐年增高。腎臟疾病大多繼發于糖尿病、高血壓、免疫傷害和細菌感染，其病因復 雜、病程遷延，并且增加心血管疾病的危險性，已經成為全球性公共健康問題。腎臟疾病可 分為兩個主要的癥候群——急性腎損傷（acutekidneyinjury，AKI)和慢性腎臟病 (chronickidneydisease，CKD)。AKI是指突發(1-7d)和持續(＞24h)的腎功能下降的一 組臨床綜合征，表現為氮質血癥、水電解質和酸堿平衡紊亂以及全身各系統癥狀，可伴有少 尿或無尿，是臨床常見的急危重癥之一。AKI的總體發病率約為1%，而住院病人的發病率高 達15%，每年引起全球200萬人死亡。越來越多的AKI遠期預后研究顯示，AKI與隨后發生的 CKD具有顯著地相關性，AKI可能導致CKD的發生。2012年，王海燕教授等在《柳葉刀》雜志上 發表的首個全國性CKD橫斷面調查表明，中國CKD患病率高達10.8%，患者預計近1.2億，但知 曉率卻僅為12.5%，且多數為腎功能明顯受損時才發現。因此尋找一種可靠的生物標志物， 在腎臟疾病發展早期進行有效診斷，對其治療和預后具有十分重要的臨床意義。

1993年，Kjeldsen等人在研究人類中性粒細胞明膠酶時，從活化的中性粒細胞的 上清液中分離純化了一種25kD的蛋白質，并命名為中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白 （neutrophilgelatinase-associatedlipocalin，NGAL）。后期的研究發現，NGAL具有多種 重要的生理作用，其異常表達對腎臟疾病的早期診斷和預后判斷具有非常重要的意義。

NGAL主要由成熟粒細胞的前體細胞中幼粒細胞和晚幼粒細胞合成，存在于中性粒 細胞特殊顆粒中，除中性粒細胞外，NGAL在人類多種組織（如子宮、前列腺、唾液腺、肺、氣 管、胃、結腸和腎等）的上皮細胞中均存在不同程度的表達。在正常腎組織中NGAL呈低水平 表達，當接觸腎毒性物質或發生缺血性損傷后，皮質腎小管、血液、尿液中會出現NGAL大量 蓄積，并可在損傷后3小時的尿液和血清中檢測到NGAL。雖然AKI在早期常常是可逆的，而且 治療上也取得了很大的進步，然而發病率和病死率依然沒有顯著改善，原因就是無法早期 發現腎損傷。目前，腎臟疾病的診斷主要依賴血清肌酐（serumcreatinine，Scr），但Scr相 對AKI是一種不敏感且比較滯后的標志物。當AKI發展至Scr升高時，很可能就錯過了治療的 關鍵時期。這就促使人們尋找更敏感的標志物，而NGAL則是眾多新標志物中最有潛力的一 種。NGAL參與腎臟的發生和發育，是急性腎損傷（Acutekidneyinjury，AKI）的早期標志 物。特別是在急診科監測尿NGAL水平比依賴Scr水平升高能更好地評估AKI患者的病情，可 幫助臨床醫師決定是否需要腎臟專科醫師會診、收住ICU、行腎臟替代治療（RRT）等處理，甚 至可以預測患者的病死率。研究顯示，AKI患者血漿和尿NGAL水平比SCr提前一天達到高 峰，在全身嚴重性多發傷的患者中，創傷發生1天后檢測尿NGAL發現，發生AKI的多發傷患者 尿NGAL濃度顯著高于未發生AKI的患者，且這種高水平可持續2天。NGAL和Scr的受試者ROC 曲線預測AKI時，NGAL的曲線下面積（AUC）顯著高于Scr。血漿NGAL高峰濃度隨著AKI嚴重程 度的增加而增加。從急診科收入院的患者，檢測其血NGAL濃度還有助于預測在院期間的病 死率。在一項多中心前瞻性研究中，從急診科收入院患者，連續采集血液標本，NGAL的AUC較 Scr和腎小球濾過率(GFR)更高。連續監測NGAL有較高的陰性預測值（98%），能在患者到達 急診科6小時內排除。