[發明專利]具有昆蟲拒食活性和生長抑制活性的化合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201610242147.0
• 申請日: 2014-07-30
• 公開（公告）號: CN105801596B
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 張勇慧;姚廣民;曾俊芬;張錦文
• 申請（專利權）人: 華中科技大學
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08;A01P7/04
• 代理公司: 華中科技大學專利中心42201
• 代理人: 夏惠忠

本申請是2014103695394號專利申請的分案申請。

原申請的申請日是：2014年7月30日。

原申請的申請號是：201410369539.4。

原申請的發明創造名稱是：具有昆蟲拒食活性和生長抑制活性的化合物及其制備方法。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，涉及瑞諾烷二萜化合物1-11的分離制備方法及用途。具體涉及分離純化過程，結構確證，免疫抑制、昆蟲拒食和生長抑制作用等。

背景技術

自身免疫性疾病是僅次于心血管疾病和癌癥的第三大疾病，目前已開發了大量的免疫抑制藥物，主要用于防止器官移植中的排斥反應和抑制某些自身免疫性疾病的進展等。其中不少藥物雖具有免疫抑制作用，但毒副作用強，容易造成全身性免疫抑制。尋找并開發出高效低毒的免疫抑制先導化合物是世界醫藥學界的一項重大課題。最新的研究發現，自身免疫性疾病和T細胞關系尤其密切。ConA能在體外刺激T細胞表面的受體，選擇性激活T細胞過度增殖，因此，利用ConA建立的脾T細胞的增殖模型可快速、高效的篩選免疫抑制的化合物。

甜菜夜蛾和棉鈴蟲都是世界范圍內廣泛分布的雜食性農業害蟲，主要危害棉花、玉米、大豆和蔬菜等作物。目前防治甜菜夜蛾和棉鈴蟲仍然主要依賴于化學農藥，但大量不合理地使用化學農藥造成了土地、水、空氣的污染，植物抗藥性產生以及危害人體牲畜健康等災害性弊端。因而植物性農藥的開發成為近年來的研究熱點，植物中的殺蟲物質主要是次生代謝物質，不會污染環境，對農作物和生態環境相對安全，且昆蟲也不易產生抗藥性，因此植物性農藥的開發應用在當前“綠色食品”生產中發揮著越來越重要的作用。

肉桂皮是樟科植物肉桂樹(Cinnamomum cassia Presl(Lauraceae))的干燥樹皮，肉桂葉即為肉桂的干燥樹葉。肉桂能調節人體免疫力，肉桂及其異瑞諾烷二萜具有抗補體的活性，肉桂具能驅蟲、凈化空氣，肉桂中有能使昆蟲拒食的活性成分。

發明內容：

本發明的任務是提供肉桂中具有生物活性的化合物及其分離制備方法和應用。

實現本發明的技術方案是：

從肉桂中分離得到瑞諾烷二萜類化合物的方法包括以下步驟：

將干燥肉桂皮粉碎，用乙醇室溫提取，合并乙醇提取液并減壓回收濃縮成浸膏，得到總膏，熱水將總膏分散至混懸狀，依次用極性遞增的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收萃取液減壓濃縮得乙酸乙酯部位，正丁醇部位，石油醚及氯仿部位去除。

將乙酸乙酯部位進行硅膠柱層析，氯仿至甲醇梯度洗脫(氯仿/甲醇10:1-3:1)，氯仿/甲醇6:1時得一段Fr.1，Fr.1經過反相硅膠柱色譜(水/甲醇9:1)得一部位，此部位再經凝膠、制備液相純化得到化合物1；

將正丁醇部位進行硅膠柱層析，氯仿至甲醇梯度洗脫(氯仿/甲醇10:1-3:1)，氯仿/甲醇8:1時得Fr.2，氯仿/甲醇6:1時得Fr.3，氯仿/甲醇5:1時得Fr.4，氯仿/甲醇4:1時得Fr.5；Fr.2經過反相硅膠柱色譜(水/甲醇9:1)得一部位，此部位再經凝膠、制備液相純化得到化合物4、5；Fr.3經過反相硅膠柱色譜(水/甲醇9:1-7:3)得二部位分別為Fr.3.1、Fr.3.2。Fr.3.1經硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合物2、6、7；Fr.3.2經凝膠、制備液相純化得到化合物8、9；Fr.4經過反相硅膠柱色譜(水/甲醇9:1)，再經硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合物3、11；Fr.5經過反相硅膠柱色譜(水/甲醇8:2)得一部位，此部位再經硅膠、凝膠、制備液相純化得到化合物10。本發明分離得到的瑞諾烷二萜類化合物1-11的結構式及名稱見表1，分離流程見附圖1。

表1.本發明從肉桂中分離得到的瑞諾烷二萜類化合物1-11結構式

其中化合物肉桂萜F、肉桂萜G為新骨架化合物，19-脫氧肉桂萜G 16-葡萄糖苷和18-hydroxyperseanol為新化合物。化合物1的單晶衍射結構圖見附圖2，化合物2的單晶衍射結構圖見附圖3。