[發明專利]一種提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法在審
| 申請號： | 201610237490.6 | 申請日： | 2016-04-15 |
| 公開（公告）號： | CN105754939A | 公開（公告）日： | 2016-07-13 |
| 發明（設計）人： | 魏偉;嵐山芮;袁嘉恩 | 申請（專利權）人： | 廣州市天河諾亞生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/078 | 分類號： | C12N5/078;C12N5/0789 |
| 代理公司： | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘暉 |
| 地址： | 510663 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提高 臍帶 血紅 細胞 定向 分化 效果 方法 | ||
1.一種提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于包含如下步驟：
以臍帶血造血干細胞為標本細胞，在含有白皮杉醇的擴增培養基中進行定向分化，得到紅系祖細胞。
2.根據權利要求1所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
所述的含有白皮杉醇的擴增培養基中白皮杉醇的濃度為5～15μmol/L。
3.根據權利要求2所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
所述的含有白皮杉醇的擴增培養基中白皮杉醇的濃度為5μmol/L。
4.根據權利要求1所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
所述的含有白皮杉醇的擴增培養基為：以基本擴增培養基為基礎加入白皮杉醇，其中，基本擴增培養基為含有細胞因子IL-3、EPO、SCF和DEX的Stemspan培養基。
5.根據權利要求4所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
所述的細胞因子IL-3的終濃度為20ng/mL、EPO的終濃度為1.5U/mL、SCF的終濃度為100ng/mL、DEX的終濃度為1nM。
6.根據權利要求1～5任一項所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于包括如下具體步驟：
(1)白皮杉醇溶解于細胞保護劑中，得到白皮杉醇儲存溶液；
(2)將步驟(1)得到的白皮杉醇儲存溶液添加到基本擴增培養基中，得到含有白皮杉醇的擴增培養基；
(3)將臍帶血造血干細胞接種至步驟(2)得到的含有白皮杉醇的擴增培養基中進行定向分化培養，得到紅系祖細胞。
7.根據權利要求6所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的細胞保護劑為二甲基亞砜與低分子右旋糖酐按體積比1:1混合得到的混合液。
8.根據權利要求6所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
步驟(3)中所述的臍帶血造血干細胞的制備方法為：采集的新鮮臍帶血，通過Ficoll淋巴細胞分離液分離單個核細胞，經過離心后，收集白膜層，加生理鹽水重懸再離心；加入細胞保護劑后程控降溫，儲存于液氮中；誘導分化前，臍帶血造血干細胞解凍，加生理鹽水重懸洗滌再離心，收集得到臍帶血造血干細胞。
9.根據權利要求6所述的提高臍帶血紅系祖細胞定向分化效果的方法，其特征在于：
步驟(3)中所述的定向分化培養的時間為1～21天。
10.一種紅系祖細胞，其特征在于通過權利要求1～9任一項所述的方法制備得到。
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