[發明專利]一種B型禽偏肺病毒亞單位疫苗

有效

• 申請號: 201610236735.3
• 申請日: 2016-04-14
• 公開（公告）號: CN105770884B
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 劉新文;孫健;鄒敏;程增青;徐保娟;郭玉廣
• 申請（專利權）人: 青島易邦生物工程有限公司
• 主分類號: A61K39/155
• 分類號: A61K39/155;A61P31/14
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

本發明提供一種B型禽偏肺病毒亞單位疫苗，包括抗原和疫苗佐劑，所用的抗原為滅活的B型禽偏肺病毒F蛋白，其中B型禽偏肺病毒F蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1。本發明將表達B型禽偏肺病毒F蛋白的基因工程畢赤酵母菌X33?F，接種培養基，在甲醇的作用下，B型禽偏肺病毒F蛋白獲得高效表達，經提取純化，加入甲醛溶液滅活后，加油佐劑混合乳化制成疫苗。本發明制備的疫苗能提高免疫后的抗體水平，提高免疫后抗體的整齊度，保證了疫苗的免疫效果，此疫苗具有高效、安全性好的優點。

技術領域

本發明屬于生物獸藥技術領域，具體涉及一種B型禽偏肺病毒亞單位疫苗。

背景技術

禽偏肺病毒屬于副黏病毒肺病毒屬，基因組為不分節段的單股負鏈RNA，可引起火雞發生呼吸道疾病，稱為火雞鼻氣管炎；感染雞后引起病毒性氣囊炎，鼻氣管炎和腫頭綜合征,產蛋下降。20世紀70年代末，禽偏肺病毒引起的疾病首次在南非報道，隨后在北美、南美、中東、遠東都有發生。1989年美國首次分離到此病毒。在分離此病毒的同時，往往可分離到波氏桿菌、巴氏桿菌、假單胞桿菌、鼻氣管炎鳥疫桿菌、糞產堿桿菌等。禽偏肺病毒能使氣管纖毛的活動受到抑制，氣管中的灰塵向外排出困難，灰塵中所帶的大量細菌很容易發生繼發感染，侵害呼吸道。病原禽偏肺病毒可分為三個型：A型感染火雞，B型感染肉雞，C型只在美國存在，A和B兩型有交叉保護作用，與C型無交叉保護作用。隨著我國禽業養殖規模的不斷擴大，因禽偏肺病毒感染導致的繼發感染也日益嚴重，對養禽業的危害非常嚴重，唯一有效辦法是通過接種疫苗來預防雞群的發病。目前國內外對禽偏肺病毒疫苗的研究大多集中在滅活疫苗的研制。

完整的病原體含有許多抗原，但并非所有抗原都能刺激宿主產生保護性應答。其中某些抗原還能引起過敏，免疫抑制和其他副作用，這是使用完整的病原體做疫苗的缺陷。并且目前國內應用的滅活苗生產制備抗原過程繁瑣，而弱毒疫苗現也有接種疫苗發病情況存在。而用亞單位疫苗則可以解決這個問題，尤其是這種疫苗除了具有抗原穩定性高，純度高，特異性強，敏感性高，不產生其他不相關抗體，免疫效果檢測方法方便準確外，還十分易于生產。不用動物體或是胚體生產，不會帶有組織殘留物。而且不需滅活，但安全性高。

發明內容

本發明的目的是提供一種B型禽偏肺病毒亞單位疫苗，所提供的疫苗具有高效、安全性好、抗體整齊度高、保護率高的優點，從而彌補現有技術的不足。

本發明的B型禽偏肺病毒亞單位疫苗，包括抗原和疫苗佐劑，所用的抗原為滅活的B型禽偏肺病毒F蛋白，

B型禽偏肺病毒F蛋白，包含有：

1)氨基酸序列為SEQ ID NO:1的蛋白，

2)在1)的蛋白上取代、缺失、添加一個或幾個氨基酸，且具有1)中蛋白功能的蛋白；

編碼上述F蛋白的基因，其核苷酸序列為SEQ ID NO:2；

其中生產B型禽偏肺病毒融合蛋白的巴斯德畢赤酵母X33-F(Pichia pastorisX33-F)，已于2016年3月9日保藏于武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCCNO:M 2016097。

其中的B型禽偏肺病毒融合蛋白經過甲醛溶液滅活；

上述的疫苗中B型禽偏肺病毒F蛋白的含量不低于50μg/0.3ml。

本發明將表達B型禽偏肺病毒F蛋白的基因工程畢赤酵母菌X33-F，接種培養基，在甲醇的作用下，B型禽偏肺病毒F蛋白獲得高效表達，經提取純化，加入甲醛溶液滅活后，加油佐劑混合乳化制成疫苗。本發明制備的疫苗能提高免疫后的抗體水平，提高免疫后抗體的整齊度，保證了疫苗的免疫效果，此疫苗具有高效、安全性好的優點。

附圖說明

圖1：本發明實施例1的F基因PCR擴增鑒定圖；

圖2：本發明F基因的核苷酸序列比對圖；